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IGFBP2、IGFBP4在实验性肝细胞损伤中的表达研究

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毕业论文范文题目:IGFBP2、IGFBP4在实验性肝细胞损伤中的表达研究,论文范文关键词:IGFBP2、IGFBP4在实验性肝细胞损伤中的表达研究
IGFBP2、IGFBP4在实验性肝细胞损伤中的表达研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目的:通过观察肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNFa)和转化生长因β_1(transforminggrowthfactorβ_1,TGFβ_1)两种细胞因子所致肝细胞损伤时胰岛素样生长因子结合蛋白2、4(insulin-likegrowthfactorbindingprotein2、4,IGFBP2、4)的表达变化,探讨IGFBP2、IGFBP4在肝损伤中的作用机制。方法:1.体外培养人肝细胞株HL-7702,分别给予TNFα、TGFβ_1两种刺激因素,采用免疫细胞化学染色方法观察人肝细胞IGFBP2、4的表达情况。其中TNFα以10ng/ml、20ng/ml、30ng/ml、40ng/ml处理24小时;TGFβ_1以2ng/ml、4n/ml、8ng/ml、16ng/ml处理24小时,分别设立正常对照组(加入等量PBS)。2.体外培养人肝细胞株H(略..)L-7702,分别给予TNFα、TGFβ_1两种刺激因素,采用MTT比色法检测两种细胞因子对肝细胞抑制率的影响,浓度和时间点同方法1。3.体外培养人肝细胞株HL-7702,设立正常对照组(加入等量PBS),以20ng/ml的TNFα处理人肝细胞株48小时,采用特异性高的Annexin-V/PI双染色流式细胞分析法对细胞凋亡进行定量分析,同时采用灵敏度高的TUNEL法原位检测凋亡细胞。结果:1-免疫细胞化学染色体外培养的肝细胞经TNFα和TGFβ_1作用后,IGFBP2、4的表达较正常对照组明显增强。各处理组均可见胞浆和胞膜有棕黄或棕褐色颗粒沉着,图像分析结果显示,各处理组与正常对照组相比统计学差异显著,其中TNFα的20ng/ml组和TGFβ_1的4ng/ml组表达最强(20ng/mlTNFα组与正常对照组相比,IGFBP2组的表达量为:40.(文章此处忽略..)66±5.80vs0.53±0.14;IGFBP4组的表达量为:41.16±9.18vs0.32±0.08,P<0.05。4ng/mlTGFβ_1组与正常对照组相比,IGFBP2组的表达量为:85.48±6.09vs0.53±0.14;IGFBP4组的表达量为:82.48±4.00vs0.32±0.08,P<0.05)。2.MTT比色法TNFα在24h不同浓度情况下,各处理组抑制率与正常对照组相比统计学差异显著(抑制率分别为10ng/ml:28.80、20ng/ml:34.80、30ng/ml:19.60、40ng/ml:18.40,p<0.05):TGFβ_1在24h不同浓度情况下,除2ng/ml组外其他各处理组与正常对照组相比统计学差异显著(抑制率分别为2ng/ml:2.60、4ng/ml:18.90、8ng/ml:8.24、16ng/ml:10.86,p<0.05)。3.相关性分析分别将TNFα、TGFβ_1诱导后的IGFBP2、4免疫细胞化学染色经图像分析测得的IOD值和其MTT测得的肝细胞抑制率做相关分析,结果提示肝细胞(本文此处忽略..)IGFBP2、4的表达与肝细胞的抑制率呈正相关关系,r值分别为:TNFα诱导后IGFBP2与抑制率:0.497(P<0.05);IGFBP4与抑制率:0.534(P<0.05)。TGFβ_1诱导后IGFBP2与抑制率:0.642(P<0.01);IGFBP4与抑制率:0.600(P<0.01)。4.Annexin-V/PI双染色流式细胞分析TNFα正常对照组有少量肝细胞凋亡,各处理组与正常对照组相比肝细胞凋亡率明显增加,(7.86±1.10vs4.76±1.11,P<0.01)。5.TUNEL法检测细胞核中有棕黄色着染者为阳性细胞,细胞呈典型的凋亡形态学改变,变小、变圆、核固缩;而相对正常的细胞胞核不着染。各处理组与正常对照组相比肝细胞凋亡率明显增加,(21.13±4.61vs3.25±1.50,P<0.01)。结论:TNFα、TGFβ_1诱导肝细胞损伤的同时,肝细胞IGFBP2、4的表达显著增加,且IGFBP2、4与肝细胞的抑制率分别呈正相关关系。(略..)推测IGFBP2、4可能参与了肝细胞的损伤过程,且在TNFα、TGFβ_1介导的肝细胞损伤中可能具有重要作用。


以上为本篇毕业论文范文IGFBP2、IGFBP4在实验性肝细胞损伤中的表达研究的介绍部分。
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