血管内皮生长因子在脂质肾毒性作用中的实验研究

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血管内皮生长因子在脂质肾毒性作用中的实验研究

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毕业论文范文题目：血管内皮生长因子在脂质肾毒性作用中的实验研究，论文范文关键词：血管内皮生长因子在脂质肾毒性作用中的实验研究
血管内皮生长因子在脂质肾毒性作用中的实验研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：临床和实验研究均证实，高脂血症在肾脏疾病的发生和发展中起重要作用。在各种肾脏疾病所致的脂代谢紊乱中，低密度脂蛋白(LDL)和氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)是导致动脉粥样硬化的主要危险因素。近年来研究发现，血管内皮生长因子(VEGF)在动脉粥样硬化的发生过程中起着不可忽视的作用，而肾小球硬化与动脉粥样硬化的病理生理机制十分相似，故VEGF可能也是脂质肾毒性的重要介质之一。本课题拟在细胞和动物模型水平研究VEGF是否在系膜细胞增殖、细胞外基质的病理性积聚和肾小球硬化的形成过程中起重要作用，探讨VEGF及其受体的表达与肾小球硬化发病机制之间的关系。方法：本课题分为体内实验和体外实验。体内实验建立实验性高胆固醇血症大鼠模型，分别于4周、8周和12周时取出肾脏，常规生化法检测大鼠血脂、肾功能水平及其24h尿蛋白排泄量，四种常规染色并进行。肾脏病理半定量分析。采用免疫组化法观察VEGF在肾组织内表达的强度，以（本文此处忽略..）及逆转录-聚合酶链式反应．(RT-PCR)法测定肾组织内VEGFmRNA的表达水平。体外实验以MSC为研究对象，分别予以不同浓度的LDL或Ox-LDL共同培养12～48h，采用流式细胞术等方法，观察VEGF对MSC增殖动力学的影响；ELISA双抗体夹心法和免疫组化法检测VEGF分泌含量及VEGF蛋白的表达部位：ELISA法检测LDL和Ox-LDL对MSC分泌TGF-β1以及合成FN的影响；RT-PCR法检测VEGFmRNA在MSC中的表达，并确认其量效关系，观察VEGF受体阻断剂PhilinopsideA对MSC增殖及合成分泌TGF-β1和FN的影响。结果：1．体内实验：实验第2周起，实验组(B组)TC、TG显著升高，12周时血脂水平最高，LDL呈现类似变化规律。实验组大鼠24h尿蛋白排泄量在实验第2和第6周时无明显差异，随实验进程至12周时，较正常对照组(A组)显著增高。两组大鼠的血清BUN、Cr在整个实验过程中无明显差异（文章此处忽略..）。8周时实验组大鼠肾组织光镜检查可见系膜细胞增生，基质增多。肾小管上皮细胞出现空泡变性，间质可见灶性炎性细胞浸润。12周时病理改变最为明显，部分肾小球呈分叶状。肾小管上皮细——胞可见核固缩、坏死、脱落，可见片状间质纤维化伴炎性细胞浸润。血管管壁增”厚明显，小动脉肌层增厚，管腔狭窄。对各组大鼠肾组织中肾小球病变进行定量分析，结果显示实验组大鼠肾小球内细胞数显著高于对照组。大鼠肾组织VEGF兔疫组化法结果显示，VEGF在实验组大鼠肾组织中表达区域和强度随实验进程明显增加，主要分布在肾小球脏层、壁层上皮细胞、系膜区和近端小管上皮细胞，小动脉内膜也可见VEGF阳性表达。RT．PCR检测结果示，实验组大鼠肾组织中VEGFrnRNA的表达随实验进程呈明显增多趋势。2．体外实验：MSC与不同浓度的LDL或OX毛DL共同培养12d4和48h后，增殖指数o）显著增高，LDL和OX－LDL呈时间依赖性和浓度依赖性地促进（文章此处忽略..）细胞DNA合成。浓度为100～200Pg／mg／mOXLDL刺激MSC48h后，存在凋亡峰，可能是山于大剂量Ox毛DL具有细胞毒性作用。VEGF受体阻断剂PhilinopsideA可抑制LDL和。OX士DL对MSC的促增殖作用，抑制率同药物浓度和作用时间呈正相关。ELISA双抗体夹。O法结果显示，不同浓度LDL和OX十DL刺激MSC可促进VEGF分泌”合成，且具有剂量依赖和时间依赖效应。兔疫组化法分析表明，VEGF蛋白随着LDL和OX毛DL浓度的增加和时间的延长逐渐增多，表现为细胞胞浆内棕黄色颗粒阳性表达信号逐渐增强。同样，RTPCR法检测结果也显示，LDL和OX毛DL能呈剂量依赖和时间依赖性促进MSCVEGF一A的表达。LDL和OX－LDL刺激MSC后，TGF－pl和FN的含量显著增多，并具有时间及剂量依赖效应，VEGF受体阻断剂PhilillopsidCA可抑制MSC分泌TGFpl及FN，该作（略..）用具有量效和时效变化。结论：LDL和OX十DL显著促进MSC的增殖，并具有剂量依赖和时hJ依赖效应。高浓度LDL和Ox－LDL具有细胞毒性作用，抑制MSC的增殖。LDL和OX毛DL呈剂量依赖和时间依赖性促进MSC合成分泌VEGF、TGF十；及FN，并促进VEGFmRN的表达，进而加速细胞外基质的沉积，促进肾小球硬化的发生发展。PhilinopsideA能抑制＊L和Ox工DL对MSC的促增殖作用，同时也可抑制MSC合成分泌TGF小及FN，进一步说明VEGF及其受体在肾小球硬化发病’机制中起关键作用。建立实验性高胆固醇血症大鼠模型，2周后出现TC、TG、LDL及尿蛋白排泄量进行性增高，并逐渐出现肾脏形态学的病变。免疫组化和RT．PCR结果显示，高脂饮食能促进大鼠肾组织中VEGF蛋白表

以上为本篇毕业论文范文血管内皮生长因子在脂质肾毒性作用中的实验研究的介绍部分。

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