蛋白酶体抑制剂联合阿霉素诱导淋巴瘤细胞凋亡的实验研究

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蛋白酶体抑制剂联合阿霉素诱导淋巴瘤细胞凋亡的实验研究

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毕业论文范文题目：蛋白酶体抑制剂联合阿霉素诱导淋巴瘤细胞凋亡的实验研究，论文范文关键词：蛋白酶体抑制剂联合阿霉素诱导淋巴瘤细胞凋亡的实验研究
蛋白酶体抑制剂联合阿霉素诱导淋巴瘤细胞凋亡的实验研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：[目的]近年来，淋巴瘤的临床治疗主要采用化疗、放疗及造血干细胞移植。随着对肿瘤发生分子机制的认识，淋巴瘤靶向治疗已成为一种新的治疗模式，目前淋巴瘤靶向治疗主要包括单克隆抗体、放射免疫治疗、特异性酶抑制剂、肿瘤疫苗等。PS-341是首个进行临床研究的蛋白酶体抑制剂，已应用于治疗多发性骨髓瘤及部分非霍奇金淋巴瘤。本实验旨在进一步研究PS-341对淋巴瘤的抗肿瘤作用，我们以霍奇金淋巴瘤细胞株L428及T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat为实验对象，观察PS-341对淋巴瘤细胞的凋亡诱导作用及其可能机制，同时观察PS341联合阿霉素对淋巴瘤细胞是否具有协同作用，为临床应用提供理论依据。[方法]1．采用MTT比色法检测PS-341对人淋巴瘤细胞株L428和Jurkat体外生长的抑制作用。2．瑞氏-姬姆萨(Wright-Giemsa)染色，油镜下观察细胞形态。3．（本文此处忽略..）应用流式细胞仪，AnnexinV和PI双染色，周期分析检测细胞凋亡。4．Western-blot法检测对L428和Jurkat细胞Bcl-2，Bax，Caspase8，Caspase3和PARP蛋白表达水平的影响。5．采用MTT比色法检测PS341联合阿霉素作用下，L428和Jurkat细胞株对PS-341的敏感性变化。[结果]1．PS-341抑制淋巴瘤细胞的生长，呈浓度依赖性：MTT比色法检测结果显示，PS341或阿霉素处理L428及Jurkat细胞24h、48h、72h，都能够明显抑制细胞增殖，且生长抑制率与药物作用浓度呈正相关(P＜0.01)，呈浓度依赖性，PS341与阿霉素处理L428细胞24h、48h、72h后的IC_(50)分别为391.82ng/ml、173.86ng/ml、49.9ng/ml和1955.56ng/ml、464.93ng/ml、74.77ng/ml；PS341与阿霉素处理Jurkat细胞24h、48h、72h后的IC_(50)分别为137.64ng/ml、69.50ng（文章此处忽略..）/ml、31.23ng/ml和471.38ng/ml、226.57ng/ml、72.58ng/ml。2．PS-341诱导淋巴瘤细胞凋亡，呈浓度依赖性：采用瑞氏-姬姆萨染色，油镜下观察PS341作用L428及Jurkat前后细胞形态学变化，出现典型的凋亡形态学特征。以流式细胞分析技术研究了细胞DNA含量、亚二倍体及磷脂酰丝氨酸(PS)转位。结果显示，PS-341作用L428及Jurkat细胞24hr，细胞凋亡率与药物作用浓度呈正相关(P＜0.01)。3．PS-341对L428和Jurkat细胞Bcl-2，Bax，Caspase8，Caspase3和PARP蛋白表达水平的影响：PS341作用L428细胞后，随浓度的增加，Bcl-2蛋白表达下调，而Bax蛋白表达上调；而Caspase3，Caspase8和PARP蛋白都出现明显的剪切带。PS341作用Jurkat细胞后Caspase8，Caspase3和PARP蛋白均出现明显的剪切带（此处忽略..）；而Bcl-2与Bax蛋白表达无改变。4．阿霉素增强L428和Jurkat细胞对PS-341的敏感性：分别以远低于IC50剂量的阿霉素单独或联合PS341处理L428和Jurkat细胞24小时，MTT结果显示，在一定浓度范围内PS341联合阿霉素组生长抑制率大于PS341与阿霉素单药组作用下的抑制率之和；流式细胞仪分析显示PS341联合阿霉素组细胞凋亡率大于PS341与阿霉素单药组作用下的细胞凋亡率之和。[结论]1．在体外，PS-341可直接抑制淋巴瘤细胞L428和Jurkat的生长，呈浓度依赖性；其抑制作用与诱导细胞凋亡有关。2．对L428细胞，PS341能下调Bcl-2蛋白的表达水平，上调Bax蛋白的表达水平，改变Bcl-2家族抗凋亡因子和促凋亡因子的表达比例，同时Caspase8蛋白出现明显的剪切激活带，其诱导凋亡机制既与线粒体途径又与外源性途径有关；而对于Jurkat细胞，PS341作（略..）用后Caspase8蛋白也出现明显的剪切激活带，通过外源性途径诱导凋亡是其机制之一。3．阿霉素增强L428和Jurkat细胞对PS-341的敏感性，在一定浓度范围内，PS341联合阿霉素具有一定的协同作用。

以上为本篇毕业论文范文蛋白酶体抑制剂联合阿霉素诱导淋巴瘤细胞凋亡的实验研究的介绍部分。

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