辛伐他汀对Tribbles在脂多糖刺激的人脐静脉内皮细胞中表达的影响

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辛伐他汀对Tribbles在脂多糖刺激的人脐静脉内皮细胞中表达的影响

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毕业论文范文题目：辛伐他汀对Tribbles在脂多糖刺激的人脐静脉内皮细胞中表达的影响，论文范文关键词：辛伐他汀对Tribbles在脂多糖刺激的人脐静脉内皮细胞中表达的影响
辛伐他汀对Tribbles在脂多糖刺激的人脐静脉内皮细胞中表达的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的1999年ROSS提出动脉粥样硬化是一种慢性炎症疾病,它的形成是血管内皮细胞、单核细胞、血管平滑肌细胞与炎症介质相互作用的结果,以粥样斑块中出现单核细胞、巨噬细胞和T淋巴细胞为特征。血管内皮细胞在动脉粥样硬化的发生发展过程中具有重要作用。血管内皮细胞直接接触血液,血液中的异常物质可直接影响内皮细胞,如ox-LDL等。血管内皮细胞受到刺激后,可分泌多种细胞因子,促进白细胞粘附、血管平滑肌细胞增殖及迁移等。Tribbles是在果蝇体内发现一种抑制有丝分裂的蛋白激酶,也称为神经细胞死亡诱导蛋白激酶(SINK)。在哺乳动物体内有三种TRBs基因家族成员:TrbI,Trb2,Trb3。Tribble（文章此处忽略..）s蛋白拥有一个相同的中心区,以及70-100个氨基酸残基的氮末端和25个残基的碳末端区。此中心区是一个类似丝氨酸一苏氨酸蛋白激酶,但缺乏赖氨酸活性位点的区域,因而具有激酶活性调控作用,可调节MAPK上游MAPKK的表达,从而调节MAPK的磷酸化,而MAPK可与转录因子NF-κB和AP-1等的表达有关。脂多糖为经典的炎症刺激物,是实验中最常用的炎症刺激因子。脂多糖可激活内皮细胞,促使NO、氧自由基、趋化因子、细胞因子、前列腺素等的表达,这些炎症因子通过自分泌或旁分泌等途径促使细胞损伤,内皮细胞间隙增大,血管基膜暴露,中性粒细胞和单核细胞等迁移内皮下,致使损伤加剧。脂多糖可通过TLR-4激活血管内皮（略..）细胞中MAPKs及NF-κB等信号传导途径。他汀类(statins)药物属于3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA)抑制剂,可以降低血清胆固醇的含量,是治疗动脉粥样硬化的常用药。越来越多的研究表明,他汀类药物不仅具有降脂作用,还具有抗炎作用,其抗炎作用主要通过抑制NF-κB途径实现。本实验应用脂多糖作为炎症刺激物,辛伐他汀作为保护药物,观察Tribbles在脂多糖激活的人脐静脉内皮细胞中的mRNA表达变化以及辛伐他汀对其表达的影响。方法1.细胞培养:取新鲜脐带,分离人脐静脉内皮细胞,培养,鉴定,传代,第2-3代的细胞用来实验。2.细胞分组:将细胞随机分成12h、24h两组,每组又分为:①对照组（此处忽略..）;②脂多糖组(100ng/mL);③辛伐他汀组(5μg/mL);④脂多糖与辛伐他汀共作用组。吸去细胞上清液后将细胞冻存在-80℃留做荧光实时定量PCR检测。3.收集细胞,分别抽取mRNA,反转录cDNA,进行荧光实时定量PCR检测IL-6、TNF-α、Trb1、Trb2及Trb3的mRNA表达,记录结果。4.上述实验重复6次,并用统计学分析软件进行统计分析。结果1.人脐静脉内皮细胞鉴定结果:形态学鉴定,相差显微镜下,内皮细胞分布均匀,单层生长,形态为多角形,鹅卵石状镶嵌排列;内皮细胞Ⅷ因子相关抗原SABC法检测鉴定,相差显微镜下,内皮细胞胞浆中可见棕黄色颗粒,鉴定结果为人脐静脉内皮细胞。2.实时定量PCR结果:与对（略..）照组相比,脂多糖组IL-6、TNF-α、Trb1及Trb3的mRNA表达明显增强(P＜0.05);与脂多糖组相比,脂多糖与辛伐他汀共作用组IL-6、TNF-α、Trb1及Trb3的mRNA表达明显减少(P＜0.05)。结论1.脂多糖可以诱导人脐静脉内皮细胞IL-6、TNF-α、Trb1及Trb3的mRNA表达增加。2.辛伐他汀可以抑制由脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞IL-6、TNF-α、Trb1及Trb3的mRNA表达。3.Trb1及Trb3可促进脂多糖刺激的HUVEC的凋亡。

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