克罗卡林对急性脑缺血再灌注大鼠MG、iNOS的影响

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克罗卡林对急性脑缺血再灌注大鼠MG、iNOS的影响

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毕业论文范文题目：克罗卡林对急性脑缺血再灌注大鼠MG、iNOS的影响，论文范文关键词：克罗卡林对急性脑缺血再灌注大鼠MG、iNOS的影响
克罗卡林对急性脑缺血再灌注大鼠MG、iNOS的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景和目的急性脑梗死是脑血管疾病(cerebrovasculardisease,CVD)的最常见类型,约占CVD的70%。脑缺血再灌注是脑缺血缺氧后重新恢复血流的过程,是临床上常见的病理生理现象。缺血再灌注对恢复半暗带区域(IschemicPenumbra,IP)脑组织的血液供应以及功能改善有重要作用,但缺血再灌注也对脑组织造成一定损伤。在脑缺血再灌注损伤的过程中,过度炎症免疫反应引起的病理损伤是重要的损伤机制之一。小胶质细胞(microglia,MG)是脑内的主要免疫效应细胞,在中枢神经系统生理和病理过程中起重要作用。小胶质细胞对颅内的内环境改变及其敏感,当脑内环境发生改变时,小胶质细胞迅速激活,产生大量的神经毒性因子,对神经元产生毒性作用,加重对脑部的损害。诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)是人体内一种重要的合酶,在脑缺血再灌注损伤时诱导合成表达,使钠离子大量内流,导致脑细胞水肿,损害神经元。（此处忽略..）K-ATP通道开放剂克罗卡林(Cromakalin)以细胞内的ATP/ADP水平为门控因素、非电压依赖性的特殊钾离子通道。K-ATP通道广泛存在中枢神经系统内,也存在小胶质细胞上,它的激活开放是机体缺血缺氧状态下的自我保护机制,可以对抗损害因子对机体的伤害。目前有关K-ATP通道开放剂克罗卡林对脑缺血再灌注损伤的作用以及小胶质细胞、诱导型一氧化氮合酶表达等方面研究较少,机制不清楚。本研究采用大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,观察大鼠急性脑缺血再灌注后神经缺损改变、脑内海马区小胶质细胞激活、诱导型一氧化氮合酶的表达情况,神经元特异性尼氏染色法检测海马区神经元数目及K-ATP通道开放剂克罗卡林干预后的变化,为K-ATP通道开放剂尽早应用于临床治疗缺血性脑血管病提供理论依据。材料与方法1.实验动物与分组：72只健康雄性SD大鼠,体重220+30g,随机分为3组：A组为假手术组,B组为单纯缺血再灌注组,C组为克罗卡林干预组,每组24只分6h、24h、72h、7d,4个时间（此处忽略..）点,每个时间点各6只。2.动物模型制备：应用改良ZeaLonga线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型。大鼠苏醒后参照ZeaLonga5分制标准【3】进行神经行为学评分：1-3分动物入选,,0、4分动物、开颅后发现脑蛛网膜下腔出血动物及再灌注后24小时之内死亡的动物弃之不用,随机等量补齐按原方案重新造模进行。3.动物处理：C组在MCAO后2h给予克罗卡林(0.4mg/kg/d)2ml腹腔注射。B组在MCAO后2h给予生理盐水2ml腹腔注射。A组除了不插入线栓其他同B组。达到各时间点后,用10%水合氯醛(350mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠,用生理盐水和4%多聚甲醛进行心脏灌注固定,取脑,制作脑部冠状石蜡切片(厚度4μm)。4.观察指标：达各时间点大鼠处死前进行神经功能缺损评分。采用免疫组化染色(SP法)检测CA1区OX42(小胶质细胞的标志)、iNOS的表达变化情况。各组取7d时间点进行海马CA1区神经元尼氏染色,每组取6张切片,在400倍视野下计数神经元。5.统计学方法：实验数据采用均数±标准差(x士s)表示,应用S（略..）PSS10.0统计软件分析,多组均数间的比较采用单因素方差分析(one-way,ANOVA),均数间的两两比较采用LSD检验,以α=0.05作为显著性检验水准。结果1.动物神经行为评分：A组大鼠清醒后无明显神经功能缺损症状,B、C组大鼠在造模后再灌注6h清醒状态下神经功能缺损评分差异不明显(P0.05)。在其他时间点B组与C组神经功能缺损相比,C组神经功能缺损较B组显著减轻(P0.05)。2.免疫组化染色海马CA1区OX42的表达情况：A组、B组、C组各个时间点海马CA1区OX42均有表达,A组4个时间点OX42表达变化不明显,B、C两组6小时开始表达,24小时明显增多,72小时达高峰,7天仍有表达,明显高于A组各时间点(P0.05)；C组各时间点OX42表达均少于B组(P0.05)。3.免疫组化染色海马CA1区iNOS的表达情况：A组、B组、C组各个时间点海马CA1区iNOS均有表达；A组4个时间点iNOS表达变化不明显；B、C两组6小时开始表达,24小时明显增多,72小时达高峰,7天仍有表达,明显高于A组各时间点(P0.05)；C组时间点iNOS表（此处忽略..）达均少于B组(P0.05)。4.神经元尼氏染色：A组神经元60.66±6.62个,B组神经元11.50-3.08个,C组神经元29.33±4.88个,三组之间差异明显,有统计学意义(P0.05)。结论1.急性脑缺血再灌注损伤后可引起大鼠海马CA1区小胶质细胞激活,诱导性一氧化氮合酶表达增多,并随着再灌注时间延长增强,对脑组织产生损害作用。2.克罗卡林可抑制海马CA1区小胶质细胞激活,抑制诱导性一氧化氮合酶表达,减少缺血再灌注对脑组织的损害作用。3.克罗卡林可保护海马CA1区神经元,减少神经元的死亡,减轻神经缺损症状,具有脑保护作用。

以上为本篇毕业论文范文克罗卡林对急性脑缺血再灌注大鼠MG、iNOS的影响的介绍部分。

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