优化的小鼠STO细胞系重编程多潜能干细胞的建立

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优化的小鼠STO细胞系重编程多潜能干细胞的建立

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毕业论文范文题目：优化的小鼠STO细胞系重编程多潜能干细胞的建立，论文范文关键词：优化的小鼠STO细胞系重编程多潜能干细胞的建立
优化的小鼠STO细胞系重编程多潜能干细胞的建立毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：诱导多功能干细胞（inducedpluripotentstemcells，iPSCs）是指通过外源导入一些与维持胚胎干细胞（embryonicstemcell，ES细胞）多能性相关的基因，使终末分化的成体细胞重编程为多能性干细胞，获得多向分化潜能和自我更新能力。iPS细胞目前可以用来替代干细胞治疗人类疾病，在分子细胞生物学、发育生物学、新药物的筛选和研发、临床细胞替代治疗等方（本文此处忽略..）面有着广阔的发展空间，但是在诱导效率和安全性方面存在一定不足，研究人员在不断寻找高效、安全的方法来弥补iPS细胞的缺陷。本研究采用连接有Oct4，Sox2，Klf4，c-Myc四个转录因子的慢病毒载体FUW-OSKM的诱导方法将鼠胚成纤维细胞系STO(SIM-6-thiogunanie-oualiain)重编程为STO-iPSCs。首先用磷酸钙法转染293FT细胞来包装慢病毒，然后用慢病毒感染（文章此处忽略..）STO细胞，以干细胞培养条件培养，诱导过程中加入了小分子物质丙戊酸（VPA，组蛋白去乙酰化抑制剂）。诱导15d后，挑取阳性细胞克隆并在无饲养层的培养体系中培养。对获取的STO-iPSCs进行生物学特性分析，包括形态学观察、碱性磷酸酶染色、免疫荧光染色、蛋白印迹检测、实时定量PCR和维甲酸定向诱导分化等，同时比较了STO-iPSCs冷冻复苏后在明胶和基质胶包被的培养皿中分别饲养时形（此处忽略..）态上的差异。研究结果：STO-iPSCs具有典型胚胎干细胞的形态特征；碱性磷酸酶染色呈阳性；实时定量PCR结果表明STO-iPSCs有很高的内源性Nanog，Oct4基因表达；免疫细胞染色进一步证明表达胚胎干细胞特异性标志Nanog和Oct4，并且能够体外诱导分化为神经细胞；基质胶包被的培养皿更适合STO-iPSCs的生长。综上所述表明，实验获得了STO-iPSCs，建立了STO（本文此处忽略..）-iPSCs无饲养层培养体系。本实验首次采用细胞系作为重编程研究的供体细胞，并且成功诱导鼠胚成纤维STO细胞系为STO-iPSCs，由于细胞系可以长期在体外培养传代和冻存复苏，在研究iPS细胞信号通路和药物检测等试验中，采用细胞系作为供体细胞，可以减少每次制备供体细胞的步骤，不但丰富了供体细胞种类，还有利于iPS细胞的产生，有助于实验研究的进展。

以上为本篇毕业论文范文优化的小鼠STO细胞系重编程多潜能干细胞的建立的介绍部分。

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