小剂量阿托伐他汀对实验性自身免疫性重症肌无力免疫调节作用的研究

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小剂量阿托伐他汀对实验性自身免疫性重症肌无力免疫调节作用的研究

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毕业论文范文题目：小剂量阿托伐他汀对实验性自身免疫性重症肌无力免疫调节作用的研究，论文范文关键词：小剂量阿托伐他汀对实验性自身免疫性重症肌无力免疫调节作用的研究
小剂量阿托伐他汀对实验性自身免疫性重症肌无力免疫调节作用的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：研究背景及目的重症肌无力(myastheniagravis,MG)是由CD4+T细胞依赖与补体参与,抗烟碱型乙酰胆碱受体抗体介导,针对神经肌肉接头处突触后膜上乙酰胆碱受体(acetylcholinereceptor,AChR)进行性破坏的一种自身免疫性疾病。实验性自身免疫性重症肌无力(experimentalautoimmunemyastheniagravis,EAMG)是模拟人类重症肌无力发病的动物模型。其临床表现、电生理学及免疫学与人类重症肌无力颇为相似,是研究人类重症肌无力的一种可靠动物模型。他汀类药物是公认的降低血浆低密度脂蛋白和胆固醇水平的药物,广泛用于心脑血管疾病的治疗。阿托伐他汀作为羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶抑制剂,其免疫调节功能主要是通过抑制甲羟戊酸(mevanolate,MVA)的生物合成,减少下游类异戊二烯焦磷（文章此处忽略..）酸法尼酯(farnesylpyrophosphate,FPP)和焦磷酸栊牛儿基栊牛儿基酯(geranylgeranylpyrophosphate,GGPP)的生成,进而抑制小GTP结合蛋白的活化和在细胞膜的锚定,阻断Rho/Rock通路来实现的[4-6]。他汀类药物的免疫调节作用逐渐被人们所认识,已被用于研究治疗各种自身免疫性疾病动物模型,包括：实验性自身免疫性神经炎,实验性自身免疫性脑脊髓炎,实验性自身免疫性葡萄膜炎,实验性自身免疫性心肌炎等[7-12]。尚未见他汀类药物治疗EAMG的研究报道。国际上有文献报道：他汀类药物可能加重人类MG,但具体机制尚不清[13-15]。本实验的目的在于探讨小剂量阿托伐他汀对于EAMG的免疫调节作用。材料与实验方法1.1材料1.1.1实验动物：雌性Lewis大鼠,6-8周龄,体质量140-160g。1.1.2主要试剂：抗原为人工合成鼠源（文章此处忽略..）乙酰胆碱受体α亚基97-116肽段。1.2实验方法1.2.1EAMG模型的诱导和临床评分于每只大鼠双后足垫皮下给予200μL抗原乳液(含50μgR97-116肽,1mgH37Ra结核杆菌,不完全弗氏佐剂)。并于免疫后第11d进行大鼠背部脊柱两侧皮下加强免疫1次。采用双盲评估法,隔天评测大鼠肌力并记录体质量。肌力测量采用Lennon临床评分。1.2.2阿托伐他汀治疗EAMG将10只Lewis大鼠随机分成阿托伐他汀治疗组(1mg/kg)和对照组(溶剂DMSO)。于EAMG大鼠发病初期开始隔日给予阿托伐他汀腹腔注射治疗,直至大鼠发病高峰期第49d。1.2.3免疫组化检测大鼠胸腺中Foxp3的表达于发病高峰期处死大鼠,取大鼠胸腺,石蜡包埋切片,免疫组化方法检测大鼠胸腺Foxp3的表达。1.2.4淋巴结单个核细胞(mononuclearcells,MNC)悬液的制备无菌条件下,取腹股沟淋巴结,在盛有细胞滤器的培养皿中研磨淋（此处忽略..）巴结,制备淋巴结MNC悬液。1.2.5CCK-8细胞增殖实验取96孔板,每孔加入4×105个淋巴结MNC,并分为R97-116刺激组和对照组。细胞培养64h后,吸取每孔细胞培养上清液,-20℃保存,择日检测细胞因子,然后每孔加入10μLCCK-8,4h后用酶标仪测定其光密度值(OD值)。1.2.6ELISA检测细胞培养上清液细胞因子IL-4的表达用R97-116刺激淋巴结MNC培养64小时后,吸取培养上清液。采用IL-4双抗体夹心法ELISA试剂盒检测培养上清液中细胞因子IL-4的表达水平。1.2.7ELISA检测大鼠血清抗R97-116抗体于发病高峰期处死大鼠,取心脏血,离心取血清,采用ELISA测血清中抗R97-116抗体的含量。1.3统计学处理采用spss17.0统计软件分析,对两组标本进行独立样本t检验,结果以均值±标准差表示,p0.05为差异有统计学意义。结果：1阿托伐他汀改善EAMG大鼠临床症状2阿托伐他汀上调EAMG大鼠（此处忽略..）胸腺Foxp3的表达3阿托伐他汀对细胞增殖实验的影响在PBS和R97-116刺激下的两种情况下,阿托伐他汀治疗组的MNCOD值均低于对照组,虽无统计学意义,但趋势是明显的。4阿托伐汀增加EAMG大鼠淋巴结单个核细胞培养上清液中IL-4的水平5阿托伐他汀降低EAMG大鼠血清抗R97-116抗体水平结论：阿托伐他汀通过上调Treg和Th2型细胞因子IL-4的水平,从而降低血清中抗R97-116抗体水平,缓解EAMG病情。

以上为本篇毕业论文范文小剂量阿托伐他汀对实验性自身免疫性重症肌无力免疫调节作用的研究的介绍部分。

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