三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞株凋亡及其机制的研究

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三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞株凋亡及其机制的研究

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毕业论文范文题目：三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞株凋亡及其机制的研究，论文范文关键词：三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞株凋亡及其机制的研究
三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞株凋亡及其机制的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景多发性骨髓瘤(multiplemyeloma，MM)是B淋巴细胞的恶性肿瘤，发病率居血液系统恶性肿瘤第二位。虽然大剂量化疗联合自体干细胞移植较传统化疗有更好的治疗效果，但是鲜有患者能够达到持续的长期缓解，浆细胞凋亡受阻在其发病及对化疗药物耐药机制中起了决定性作用。三氧化二砷(As_2O_3)已成功地用于急性早幼粒细胞白血病(APL)的治疗，越来越多的证据表明砷剂的抗肿瘤作用并不仅限于白血病，As_2O_3治疗各类恶性肿瘤已成为近几年肿瘤研究的热点。砷剂治疗APL的机制主要是诱导分化和促进白血病细胞凋亡，但这不能完全解释它对其它肿瘤细胞的作用，其具体机制有待进一步的阐明。核因子κB(nuclearfactor-κ「浙江大学医学院硕士学位论文JB，NF一KB)包括一个转录因子（此处忽略..）家族，参与炎症反应、免疫应答、细胞增殖分化及细胞凋亡的转录调控，NF一B活性的失调能引起包括肿瘤和炎症在内的多种人类疾病。多种实体瘤细胞中都可观察到有NF一B的持续激活，在人骨髓瘤细胞株和骨髓瘤患者骨髓单个核细胞中也发现有NF一B活性异常升高，以抗凋亡及维持细胞增殖。本研究观察As203对MM细胞株KM3、RpM工8226细胞的作用，探讨砷剂细胞毒作用机制。材料和方法人骨髓瘤细胞株KM3和RPM工8226由浙江大学医学院血液病研究所提供。实验设定细胞培养中加入不同浓度的AsZO3为实验组，细胞培养中不加ASZO3为空白对照组，不加As203和特异性一抗为阴性对照组。根据预实验结果及文献报道，设定实验中AsZO3的浓度梯度为O，0.5，1，2，5，10和20umol/1，检测时间点选择在培养后24小时。通过绘制生长（文章此处忽略..）曲线观察砷剂在体外对KM3和RPM工8226细胞的增殖抑制作用，以MTT法测定不同浓度砷剂对细胞的抑制率并求得其24小时的半数抑制浓度(IC5o)。用流式细胞术(floweytometry，FCM)测定砷剂对细胞的诱导凋亡作用及细胞周期分析，同时测定细胞浆内工KB一a蛋白的变化。用间接免疫荧光法进一步观察砷剂作用前后工KB一蛋白改变及定位，并用Western印记法检测两种细胞胞核内P65蛋白的表达。结果研究结果表明AsZ飞对2种人骨髓瘤细胞株KM3和RPM工8226均有增殖抑制作用，并且都呈剂量依赖性，KM3和即M工8226的24小时的半数生长抑制浓度IC50值分别为9.61umol/1及8.01umol/l。FCM结果表明0.5~20umol/1的AsZO3作用24小时后上述2种细胞株凋亡率均有不同程度的增高，砷剂浓度在10umOI/1时己出现（此处忽略..）明显的凋亡，浓度增至20umol/1时KM3和RPM18226的凋亡率分别达到了r浙江大学医学院硕士学位论文J41.ISryo和65.25%。砷剂作用KM3后分析细胞周期变化，GZ/M期细胞比例由13.74%升至41.72%，S期细胞比例则由35.H%降至23.96%。FCM间接荧光法结果表明AsZO3作用骨髓瘤细胞后胞浆中1KB一a蛋白阳性表达率明显减少，KM3由对照组的76.68士3.71%减少到10umol/1时的51.57士4.20%(尸(0.01)，RPMI8226由对照组的79.72士3.56%减少到10umol/1时的34.08士3.70%(P0.01)，且此降解作用呈剂量依赖性。用间接免疫荧光法观察空白对照组的骨髓瘤细胞，细胞内工KB一a在荧光显微镜下呈现明亮的黄绿色荧光，多呈环状分布于整个胞浆中，10umol/1的As203诱导细胞后，胞浆中荧光强度明显减弱。Western印迹法显示2种细胞均有NF一KB的持续活性表达，AS203作（略..）用后呈剂量相关性蛋白表达降低。结论AS203对人骨髓瘤细胞株KM3和RPM工8226均有增殖抑制和诱导凋亡作用，且在本实验浓度范围内呈剂量依赖性。其机制和抑制骨髓瘤细胞NF一KB活性、下调NF一B基因产物表达有关。砷剂同时影响细胞周期，使GZ/M期转换延长从而抑制细胞增殖。

以上为本篇毕业论文范文三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞株凋亡及其机制的研究的介绍部分。

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