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环氧水解酶的克隆表达和催化性能研究

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毕业论文范文题目:环氧水解酶的克隆表达和催化性能研究,论文范文关键词:环氧水解酶的克隆表达和催化性能研究
环氧水解酶的克隆表达和催化性能研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:近年来,越来越多的全基因组序列陆续公布,加快了目的基因的克隆速度。本课题采用多种基因克隆策略,成功从毛果杨和巨大芽孢杆菌中克隆出多个环氧水解酶(EHs)。通过对巨大芽孢杆菌环氧水解酶(BMEH)的底物谱研究,发现它能够高度对映选择性地催化水解(略..)芳基缩水甘油醚类底物,得到高光学纯度的环氧化物或邻位二醇。BMEH催化模型底物苯基缩水甘油醚(PGE)水解拆分的E值达到58,是目前发现的对于该底物选择性最高的天然EH。对于邻位取代的苯基缩水甘油醚和对硝基苯乙烯氧化物,E值超过200。研究中还发现(此处忽略..)邻位硝基在苯环上的取代(oNPGE)使BMEH的对映选择性发生了剧烈的转换。有趣的是,虽然BMEH对该底物和间位硝基取代时的(mNPGE)选择性相反,但E值都超过200。区域选择性研究表明,BMEH一般主要进攻环氧乙烷环上取代基团较少的碳原子,但对(略..)于oNPGE,却反常地主要进攻取代基团较多的碳原子。鉴于oNPGE能够改变BMEH的对映选择性,我们利用分子对接技术在分子水平上成功地解释了这一现象。最后以BMEH粗酶冻干粉为催化剂,实现了五种光学纯环氧化物的百毫克级规模制备。并进一(本文此处忽略..)步以邻甲基苯基缩水甘油醚(oMPGE)为例,提高了底物终浓度,得到克级光学纯环氧化物以及光学纯度较高的邻位二醇。表明了BMEH作为生物催化剂,在制备光学纯环氧化物和邻位二醇方面具有潜在的应用前景。


以上为本篇毕业论文范文环氧水解酶的克隆表达和催化性能研究的介绍部分。
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