表达裂谷热病毒糖蛋白重组山羊痘病毒的研究

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表达裂谷热病毒糖蛋白重组山羊痘病毒的研究

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表达裂谷热病毒糖蛋白重组山羊痘病毒的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：裂谷热(RiftValleyFever,RVF)是反刍动物和人共患的一种烈性传染病,可通过虫媒(库蚊等)及直接接触等途径传播,具有传染性强、致死率高、易感动物广泛等特性。RVF每次流行均造成巨大的社会经济损失和公共卫生危机。国际兽医局(OIE)已将RVF列为A类传染病,也是国际上重要的生物武器研究对象及生物反恐防范对象。RVF主要流行于非洲,2000年前后蔓延至中东及阿拉伯半（此处忽略..）岛。近年,南亚地区也有迹象表明存在该病毒的流行。随着全球化贸易、人员交往快速发展及全球气候变暖趋势的加速,我国面临RVF等新发传染病的威胁也越来越严重,急需开展疫苗、诊断监察技术等相关防控技术的研究。裂谷热病毒(RiftValleyFeverVirus,RVFV)为布尼安病毒科(Bunyaviridae)的Phlebovirus属成员,仅一个血清型。囊膜糖蛋白G是（此处忽略..）RVFV的主要结构蛋白及保护性免疫原,由基因组M节段编码,翻译后裂解为GN和GC两个亚单位。山羊痘病毒(Goatpoxvirus,GPV)宿主范围明确,主要限于山羊和牛等反刍兽。GPV基因组容量大,遗传性稳定,复制非必需区明确,可耐受大片段外源基因的插入、重组和表达,作为重组病毒载体疫苗不影响流行病血清学监测。本研究首先以我国自行培养并得到广泛应用的山羊痘病毒（本文此处忽略..）(GPV)疫苗株为载体,以复制非必需区TK基因为插入靶点,通过同源重组,构建了痘病毒晚期启动子p11驱动、内部核糖体进入位点(ires)介导的黄嘌呤鸟嘌呤磷酸转移酶基因(gpt)和绿荧光蛋白基因(gfp)串联表达的重组病毒rGPV-gpt-ires-egfp。在此基础上,进一步构建痘病毒早晚期启动子p7.5驱动RVFV保护性抗原G基因片段重组病毒rGPV-gie-rvfv-g(n+（此处忽略..）c),利用霉酚酸(Mycophenolicacid,MPA)药物筛选后,经PCR、Western-blot和IFA(间接免疫荧光)方法证实G蛋白在重组病毒中稳定表达,并被有效裂解为GN和GC两个亚单位,重组病毒具有良好细胞生长特性。本研究为RVF重组山羊痘病毒活载体疫苗的研制奠定了坚实的基础。

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