利用RNAi技术沉默麦长管蚜与桃蚜细胞色素P450

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利用RNAi技术沉默麦长管蚜与桃蚜细胞色素P450

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利用RNAi技术沉默麦长管蚜与桃蚜细胞色素P450毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：麦长管蚜和桃蚜是多种经济作物的主要害虫，对农业生产造成了重大的经济损失。细胞色素P450基因是一类广泛存在于许多生物中的血红素铁结合蛋白的超基因家族，细胞色素P450参与生物的药物代谢、重要的激素合成等多种代谢途径，与许多生物的生命活动息息相关。近年来，植物介导的RNAi技术已成为农作物抗虫基因工程的热点之一。本实验采用PCR克隆获得麦长管蚜和桃蚜体内细胞色素P450基因片段，利用体外合成的双链（此处忽略..）RNA（dsRNA）分别对麦长管蚜和桃蚜进行饲喂，通过RT-PCR分析取食后蚜虫细胞色素P450基因表达水平的变化情况，研究利用RNAi技术是否可以沉默麦长管蚜和桃蚜体内细胞色素P450基因，从而达到控制害虫危害的目的，为利用RNAi技术创制抗蚜虫小麦和蔬菜提供依据。本研究取得了如下实验结果：1．从麦长管蚜与桃蚜的cDNA中分别克隆出单一的细胞色素P450基因目的片段，所克隆的两个片段同源性为90.1%，（此处忽略..）经过测序验证获得了麦长管蚜和桃蚜的细胞色素P450基因cDNA序列信息和氨基酸序列信息，并且选择了13种细胞色素P450氨基酸序列相似程度高的昆虫，构建了系统进化树。2．实验发现随着饲喂P450dsRNA浓度的增大，麦长管蚜和桃蚜的死亡率随着时间的推移不断升高，最高死亡率可分别达75.56%和64.44%。与对照组相比在统计学上表现为差异显著或极显著，而增大饲喂绿色荧光蛋白基因（GFP）dsRNA的浓度，麦长管蚜和桃蚜的（文章此处忽略..）死亡率并不随时间的推移而升高，与对照组相比在统计学上没有表现出显著性差异。在饲喂P450dsRNA8d后，两种蚜虫均表现出发育受阻，而没有饲喂dsRNA和饲喂GFPdsRNA的蚜虫可以正常发育。3．实时荧光定量PCR结果表明，所设计的荧光定量引物特异性良好，可以用于荧光定量PCR实验。通过对荧光定量仪器产生的数据进行处理和分析，发现饲喂2、4、6、8d（dsRNA浓度为7.5ng·μl-1的试验组）后（文章此处忽略..），麦长管蚜和桃蚜体内的细胞色素P450基因表达水平随着饲喂时间的延长而不断地降低，说明利用麦长管蚜和桃蚜细胞色素P450基因保守序列dsRNA，体外饲喂相应的蚜虫后，能够显著降低麦长管蚜和桃蚜体内细胞色素P450基因的表达水平，并且导致目的基因沉默和蚜虫死亡。

以上为本篇毕业论文范文利用RNAi技术沉默麦长管蚜与桃蚜细胞色素P450的介绍部分。

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