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肝细胞成长因子基因润饰的骨髓间充质干细胞对扩心病大鼠心肌纤维

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毕业论文范文题目:肝细胞成长因子基因润饰的骨髓间充质干细胞对扩心病大鼠心肌纤维,论文范文关键词:肝细胞成长因子基因润饰的骨髓间充质干细胞对扩心病大鼠心肌纤维
肝细胞成长因子基因润饰的骨髓间充质干细胞对扩心病大鼠心肌纤维毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:第一部分察看hHGF基因润饰的MSCs对扩大型心肌病大鼠心功能的影响目标:移植肝细胞成长因子(hHGF)基因润饰的大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)到扩大型心肌病心力衰竭的大鼠体内,察看移植后对心功能的影响。方法:将构建好的Ad-hHGF进行体外扩增、测定病毒滴度;提取新鲜骨髓,分别、培养并鉴定MSCs;将带有hHGF基因的腺病毒载体感染第3-4代MSCs,荧光显微镜检观测转染效力。通过腹腔打针阿霉素制造SD大鼠心肌病心力衰竭模型,随机分为模型组、MSCs组、MSCs-hHGF组跟畸形对比组,每组8只,MSCs-hHGF组经尾静脉打针Ad-hHGF感染的MSCs3x10~6/100ul,MSCs组打针MSCs3x10~6/100ul,模型组跟畸形对比组打针磷酸盐缓冲液(PBS)各100ul;在移植后不同时光检测血浆hHGF蛋白;移植后4周,利用生理信号体系检测心功能.成果:病毒扩增后噬斑实验测定Ad-hH(文章此处忽略..)GF的滴度为1.3x10~(10)pfu/ml。Ad-GFP感染MSCs,感染率随感染复数(MOI)的增加而增加,当MOI值为100时,感染率达到99.3%。MSCs的流式细胞仪鉴定成果:CD90,CD44,CD34,CD11分辨为97.70%,99.90%,2.08%,15.90%。与模型组比拟,MSCs组跟MSCs-hHGF组大鼠心功能明显改良:左室紧缩峰压(LVSP)增加(p<0.05),左室舒张末期压(LVEDP)降落(p<0.05);MSCs-hHGF组较MSCs组心功能亦有明显进步:LVEDP(p<0.05),LVSP(p<0.05)。MSCs-hHGF组大鼠血浆中可能检测到hHGF蛋白,第9天含量最高随后渐降。论断:1.MSCs可能作为通过腺病毒转染hHGF基因的幻想载体细胞。2.MSCs经尾静脉移植可改良扩心病的心功能;Ad-hHGF润饰的MSCs较MSCs可进一步改良扩心病心功能;移植Ad-hHGF润饰的MSCs在体内可短期表白HGF。第二部分探讨hHGF基因润饰MSCs(文章此处忽略..)移植后对扩心病大鼠心肌纤维化跟凋亡的影响目标:探讨肝细胞成长因子(hHGF)基因润饰MSCs移植后对阿霉素引诱的扩心病心衰大鼠心肌纤维化跟凋亡的影响方法:尾静脉移植干细胞检测心功能后,苦味酸天朗猩红染色察看心肌胶原纤维的变更,偏振光显微镜察看Ⅰ/Ⅲ型胶原纤维的改变:免疫组化检测左室心肌hHGF跟MMP-1(基质金属蛋白酶-1)及TIMP-1(基质金属蛋白酶克制因子-1)的表白;TUNEL法检测心肌细胞凋亡。成果:(1)心肌天狼猩红染色示:与畸形对比组比拟,模型组胶原容积分数CVF明显增加(7.00±0.41%vs1.60±1.09%,,P<0.01);与模型组比拟,MSC-hHGF组跟MSCs组CVF皆明显降落(1.95.±0.27%vs7.00±0.41%,P<0.01;3.44±0.60%vs7.00±0.41%,P<0.05);MSC-hHGF组跟MSCs组之间也有明显差别(1.95.±0.27%vs3.44±0.60%,P<0.05);偏振光显微镜察看到MSC-hHGF组跟MSCs组Ⅰ型胶原比例较模型组明显降落(53.(此处忽略..)56±8.57%vs78.45±11.32%,P<0.01;66.35±10.01vs78.45±11.32%,P<0.05),MSC-hHGF组较MSCs组降落(53.56±8.57%vs66.35±10.01%,P<0.05);同模型组比拟,MSCs组MMP1含量明显高于扩心病组(p<0.05),而MSC-hHGF组高于MSC组(p<0.05);MSC组TIMP-1含量与模型组无差别,MSC-hHGF组较模型组降落(p<0.05)(2)MSC-hHGF组中hHGF含量明显高于畸形组(p<0.01),模型组及MSC组,后三组之间表白无差别(3)跟模型组比拟,MSC-hHGF组跟MSC组心肌细胞凋亡率明显减小(14.52±2.78%vs23.90±3.19%,p<0.01;17.24±2.46%vs23.90±3.19%,p<0.05),而MSC-hHGF组跟MSC组间无明显差别。论断1,hHGF润饰的MSCs较MSCs能进一步克制扩心病大鼠心肌组织纤维化,可能与hHGF激活基质金属蛋白酶有关。2,hHGF-MSCs组较MSCs组在抗扩心病大鼠心肌细胞凋亡上无明显差别。3,hHGF-MSCs组较MSCs组可能(文章此处忽略..)更大程度川进步扩心病心功能,可能与hHGF-MSCs更强的克制心肌纤维化的才能有关,而与克制心肌细胞凋亡无关。


以上为本篇毕业论文范文肝细胞成长因子基因润饰的骨髓间充质干细胞对扩心病大鼠心肌纤维的介绍部分。
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