金属螯合亲跟色谱填料的制备及其在六聚组氨酸融合蛋白分别中的利

搜索高级搜索

原创毕业论文

金属螯合亲跟色谱填料的制备及其在六聚组氨酸融合蛋白分别中的利

作者: 浏览:3次

免费专业论文
政治工作论文
计算机论文
营销专业论文
工程管理论文范文
医药医学论文范文
法律论文范文
生物专业论文
物理教学论文范文
人力资源论文范文
化学教学论文范文
电子专业论文范文
历史专业论文
电气工程论文
社会学专业论文
英语专业论文
行政管理论文范文
语文专业论文
电子商务论文范文
焊工钳工技师论文
社科文学论文
教育论文范文
数学论文范文
物流论文范文
建筑专业论文
食品专业论文
财务管理论文范文
工商管理论文范文
会计专业论文范文
专业论文格式
化工材料专业论文
英语教学专业论文
电子通信论文范文
旅游管理论文范文
环境科学专业论文
经济论文
人力资源论文范文
营销专业论文范文
财务管理论文范文
物流论文范文
财务会计论文范文
数学教育论文范文
数学与应用数学论文
电子商务论文范文
法律专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文
计算机专业论文
环境艺术专业论文
信息计算科学专业
物流专业论文范文
人力资源论文范文
教育管理论文范文
现代教育技术论文
小学教育论文范文
机械模具专业论文
报告,总结,申请书
理工科专业论文
心理学论文范文
学前教育论文范文

毕业论文范文题目：金属螯合亲跟色谱填料的制备及其在六聚组氨酸融合蛋白分别中的利，论文范文关键词：金属螯合亲跟色谱填料的制备及其在六聚组氨酸融合蛋白分别中的利
金属螯合亲跟色谱填料的制备及其在六聚组氨酸融合蛋白分别中的利毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：近年来，跟着基因工程技巧的发展，分别纯化基因重组蛋白的下游技巧越来越显示出其重要性。从成分复杂的表白体系中分别纯化目标蛋白是一项艰巨而沉重的任务。目前基于分子的尺寸、外形、电荷、分子量、吸附等性质的差别进行蛋白质分别的方法也已在蛋白质纯化中得到不同程度的利用，而金属螯合亲跟层析法(MetalChelateAffinityChromatographic，MCAC.又叫固定金属离子亲跟层析法ImmobilizedMetalionAffinityChromatography，IMAC)以其辨别率高、抉择性好、操作简单而成为一种重要的蛋白质分别方法。研究表明，影响金属螯合亲跟色谱分别后果的因素很多，如溶液的pH值、盐浓度、洗脱方法等，但决定色谱填料分别后果的重要因素在于填料的基质、配基及螯（本文此处忽略..）合金属离子品种。琼脂糖(Agarose)存在良好的亲水性跟牢固性，与可溶性蛋白的非特异性反应小。作为填料基质既可在非变性前提下利用，又可在变性前提(如6mol／L盐酸胍或8mol／L尿素)下利用。本实验用琼脂糖作为基质，选用四配位，与金属离子有较强作使劲的羧甲基天冬氨酸为配基，以Co~(2+)、Ni~(2+)作为螯合金属离子，合成了一系列金属螯合亲跟色谱填料，并对其蛋白质分别机能进行了研究。论文重要工作为以下多少个方面：1．以琼脂糖(商品名SepharoseCl-6B)为基质，环氧氯丙烷为交连剂，以羧甲基天冬氨酸(CM-Asp)为配基制备了分辨螯合Co~(2+)跟Ni~(2+)的两种色谱介质：Agarose-CM-Asp-Co、Agarose-CM-Asp-Ni。对琼脂糖基质跟Agarose-CM-Asp-Co、Agaros（本文此处忽略..）e-CM-Asp-Ni的红外光谱表征成果表明：Co~(2+)、Ni~(2+)已经分辨成功地螯合到被润饰的琼脂糖微球上。琼脂糖基质与Agarose-CM-Asp-Ni微球的电镜照片对比成果显示：介质名义光滑，阐明在实验过程中不引起微球形貌的变更，即在实验过程中不产生能引起非特异性吸附的因素。用这两种介质对六聚组氨酸融合蛋白进行了分别，对目标蛋白的洗脱液做了SDS-PAGE分析，成果表明：两者都获得了良好的分别后果，并且Agarose-CM-Asp-Co分别后果最佳。2．以琼脂糖为基质，环氧氯丙烷为交联剂，制备了一系列不同羧甲基天冬氨酸担载量的介质微球：Agarose-0.5CM-Asp、Agarose-CM-Asp、Agarose-2CM-Asp。对其进行了滴定分析，测得各自的配基数量顺次分辨为：3.（本文此处忽略..）34×10~(-5)、3.83×10~(-5)、4.14×10~(-5)mol／L。成果表明：固然配基CM-Asp的参加量成倍增加，但琼脂糖名义所能担载的配基CM-Asp的量增幅不大，阐明在本实验前提下配基CM-Asp的螯合量已基本饱跟。对上述三种不同CM-Asp担载量所制备螯合金属离子样品进行湿法硝解，通过原子接收测定金属离子担载量，其成果也支撑了上述观点。用上述三种不同CM-Asp担载量的微球所制备的金属离子Co~(2+)、Ni~(2+)螯合材料做六聚组氨酸融合蛋白分别，成果显示，金属离子螯合量的变更只影响到色谱介质的蛋白质吸附量，而对分别纯度不明显影响。3．优化了对200μL细胞裂解液纯化所需的Agarose-CM-Asp-Co的介质用量、Agarose-CM-Asp-Co与细胞裂解液的孵育时光、介质的荡涤前提、目标蛋白洗脱时所需咪唑浓（略..）度等前提。比较了Agarose-CM-Asp-Co与Ni-NTA-Agarose(Qiagen公司产品)两种螯合介质对融合蛋白的纯化后果。成果表明：针对200μL细胞裂解液的纯化体系，优选Co-CM-Asp-Sepharose(50％的悬浮液)的体积为60μL，最佳孵育时光为30min，洗脱时最佳咪唑浓度为200mM。与商品化的Ni-NTA-Agarose介质比拟，荡涤前提简单，介质抉择性好，洗脱得到的靶蛋白纯度高。且本研究所得到的分别介质Agarose-CM-Asp-Co的分别机能优于与Qiagen公司产品Ni-NTA-Agarose。

以上为本篇毕业论文范文金属螯合亲跟色谱填料的制备及其在六聚组氨酸融合蛋白分别中的利的介绍部分。

本论文在论文格式栏目，由论文网(www.zjwd.net)整理,更多论文,请点论文范文查找

收费专业论文
汉语言文学论文
物理学论文
自动化专业论文
测控技术专业论文
历史学专业论文
机械模具专业论文
金融专业论文
电子通信专业论文
材料科学专业论文
英语专业论文
会计专业论文
行政管理专业论文
财务管理专业论文
电子商务国贸专业
法律专业论文
教育技术学专业论文
物流专业论文
人力资源专业论文
生物工程专业论文
市场营销专业论文
土木工程专业论文
化学工程专业论文
文化产业管理论文
工商管理专业论文
护理专业论文
数学教育专业论文
数学与应用数学专业
心理学专业论文
信息管理专业论文
工程管理专业论文
工业工程专业论文
制药工程专业论文
电子机电信息论文
现代教育技术专业
新闻专业论文
热能与动力设计论文
教育管理专业论文
日语专业论文
德语专业论文
轻化工程专业论文
社会工作专业论文
乡镇企业管理
给水排水专业
服装设计专业论文
电视制片管理专业
旅游管理专业论文
物业管理专业论文
信息管理专业论文
包装工程专业论文
印刷工程专业论文
动画专业论文
营销专业论文范文
工商管理论文范文
汉语言文学论文范文
法律专业论文范文
教育管理论文范文
小学教育论文范文
学前教育论文范文
财务会计论文范文

电子商务论文范文

上一篇：榆耳发酵工艺及药效学初步研究

下一篇：古代金属装潢艺术—金属锻造工艺..