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新生期树鼩感染人乙型肝炎病毒模型的优化

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毕业论文范文题目:新生期树鼩感染人乙型肝炎病毒模型的优化,论文范文关键词:新生期树鼩感染人乙型肝炎病毒模型的优化
新生期树鼩感染人乙型肝炎病毒模型的优化毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目标:通过摸索跟比较不同的感染源、接种方法、检测方法跟其它帮助办法的感染后果,进一步优化新生期树鼩感染HBV模型。方法:第一部分.优化感染源,制备的多种感染源重要包含:1.乙肝患者单份血清或多份混淆血清;2.已证明感染了HBV的树鼩血清;3.分泌HBV颗粒的HepG2.2.15细胞培养液上清;4.含HBV基因组的质粒pT-HBV1.3;5.经过纯化的乙肝患者血清。第二部分.优选接种方法,重要的接种方法包含:1.单纯皮下打针;2.单纯腹腔打针;3.皮下+腹腔打针;4.静脉+腹腔打针;5.经皮直接肝打针;6.剖腹经脾脏肝打针。第三部分.优选合适检测树鼩体内HBV感染标记的方法,重要包含:1.利用FQ-PCR检测血清跟肝组织HBVDNA;2.利用ELISA定性检测血清样品的HBV免疫学标记(乙肝两对半);3.利用TRFIA定量检测血清样品HBsAg;4.利用Dotblot方法检测肝组织的HBVD(本文此处忽略..)NA;5.用电子显微镜察看血清跟肝组织的HBV颗粒;6.用免疫组化方法检测肝组织的HBsAg跟HBcAg;7.用光学显微镜察看肝组织病理变更。第四部分.摸索进步感染效力的其它帮助办法,重要包含:1.用已证明感染了HBV的母树鼩进行繁殖出产;2.对妊娠后期的母树鼩接种HBV感染血清;3.免疫克制剂利用于树鼩接种HBV期间;4.比较新生期(出生1周内)跟非新生期(出生1周~1年)树鼩接种HBV的感染后果。成果:第一部分.在多种感染源中,乙肝患者单份血清跟已证明感染HBV的树鼩血清显示出较佳感染后果:至目前6只已证明持续感染68周以上的树鼩中,5只以单人血清(纯化或未经纯化)接种,1只以已证明感染HBV的树鼩血清接种;以其它感染源接种的树鼩均未获得明白的持续感染后果。第二部分.以上6只长期携带HBV的树鼩中,4只为单纯皮下打针接种,2只为皮下+腹腔打针接种;以其它方法接种的动物均未获得明白的持续感(此处忽略..)染。第三部分.1.FQ-PCR检测成果显示,6只持续感染的树鼩血清HBVDNA拷贝数在接种第12~30周后持续为103~104/ml,肝组织HBVDNA拷贝数大都在接种后第12周显示为104~106/μg肝组织总DNA,当前逐步升高并保持在107~108/μg肝组织总DNA。2.ELISA跟TRFIA检测成果显示持续感染的6只动物中,4只接种后的多次血清标本均呈HBsAg阳性并保持在较高程度,另2只显示间断弱阳性。3.Dotblot所测4只持续感染动物的肝组织HBVDNA,成果均为阳性。4.电镜察看3只持续感染动物标本的成果显示,血清均可察看到直径濒临40nm的大球形颗粒即Dane颗粒,还可见小球形颗粒跟杆状颗粒;其中2只的肝组织可见到细胞核内HBV早期复制颗粒跟细胞浆内晶格状排列的HBV颗粒。5.免疫组化成果显示,所测3只持续感染动物的肝组织内均可见HBsAg跟HBcAg阳性的肝细胞。6.光镜下树鼩肝组织病理改变略微,可(此处忽略..)见炎细胞浸润、肝细胞轻度增生跟水肿。第四部分.1.长期携带HBV的母树鼩所产4仔均夭折,肝组织内未查到明白的HBV感染证据。2.妊娠后期接种HBV感染血清的母树鼩所产的仔树鼩,部分于接种后6或12周肝组织HBVDNA拷贝数处于中等程度(103~105/μg肝组织总DNA),血清HBsAg呈低程度,但至接种后48周未见明白的持续感染者。3.新生期接种HBV并同时用免疫克制剂(CsA)的树鼩,在接种后12周时血清跟肝组织HBVDNA拷贝数为阴性~104,2只动物血清HBsAg呈弱阳性;成年期接种同时用免疫克制剂的树鼩,血清中仍较早呈现HBsAb并且未呈现其它HBV感染标记,少数动物肝组织HBVDNA拷贝数为103~104。4.本课题获得的6只(6/77,7.79%)持续感染HBV动物全部为出生后3日龄内接种;因某些操作的须要本课题接种了非新生期动物共49只,无一显示明白感染。论断:1.HBV单人血清跟已证明感染了HBV的树鼩血清是感染新生(此处忽略..)树鼩的较佳感染源;2.单纯皮下打针跟皮下+腹腔打针是新生期树鼩的较好接种方法;3.用于检测人血清样品HBVDNA的FQ-PCR试剂跟方法以及用于检测人血清样品HBV免疫学标记的ELISA/TRFIA试剂跟方法实用于检测树鼩标本,成果牢固;Dotblot、电子显微镜察看跟免疫组化染色实用于树鼩感染HBV的最后验证;4.用已证明感染HBV的树鼩血清接种新生期树鼩跟新生树鼩在接种HBV期间利用免疫克制剂等办法,能减少接种后血清呈现HBsAb,因此可能有助于进步HBV对树鼩的感染后果。


以上为本篇毕业论文范文新生期树鼩感染人乙型肝炎病毒模型的优化的介绍部分。
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