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窒息法心肺脑复苏大鼠脑组织含水量跟AQP4表白程度相干性研究

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毕业论文范文题目:窒息法心肺脑复苏大鼠脑组织含水量跟AQP4表白程度相干性研究,论文范文关键词:窒息法心肺脑复苏大鼠脑组织含水量跟AQP4表白程度相干性研究
窒息法心肺脑复苏大鼠脑组织含水量跟AQP4表白程度相干性研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目标在心肺脑复苏(CardiopulmonarycerebralResuscitationCPCR)过程中,脑水肿(cerebraledema)的产生对复苏的预掉队展有着非常重要的作用,研究在心肺复苏过程中引起脑水肿的因素从而显得非常重要。各种起因所致呼吸轮回骤停均可引起脑水肿,重者危及生命。对其医治重要局限于浸透性利尿或外科减压,尚少针对脑水肿构成机制方面的医治。早先有研究显示,水通道蛋白(aquaporinAQP)是大脑水转运的一个重要道路,它可能参加多种神经体系疾病中脑水肿的构成。水通道蛋白是对水专一的通道蛋白,广泛存在于动物动物跟微生物中。它所介导的自由水疾速被动的跨生物膜转运,是水进出细胞的重要道路。大脑中表白的水通道蛋白重要是AQP1跟AQP4,其中AQP4更为重要。已经有研究证明,AQP4参加了包含脑创伤、脑堵塞、水中毒、脑出血等疾病的脑水肿构成。然而,对AQP4在心肺脑复苏中脑水肿中的表白跟作用,目前还缺乏研究。本实验通过树破大鼠心跳呼吸骤停模型,并且进行正规的心肺脑复苏操作,而后根据复苏成果的不同,切取脑组织测量其脑组织含水量,并且进行免疫组织化学染色跟免疫印迹技巧检测,通过图像软件分析不同复苏成果的大鼠脑(此处忽略..)组织中的AQP-4的表白,以及进行脑组织含水量并且进行统计学分析跟处理,比较不同复苏成果下脑组织含水量的不同情况,以及不同情况下脑组织中AQP-4的表白与脑组织含水量的关联,从而分析其在心肺脑复苏中的可能作用,为心肺脑复苏的分子程度研究,提供一个新的思路。研究对象与方法1、动物模型制造通过采取夹闭气管窒息的方法,树破大鼠心跳呼吸骤停模型,并且进行心肺脑复苏操作,包含体外心脏按压,呼吸机帮助通气。在实验结束后,根据不同组别(复苏成功组,复苏失败组,畸形对比组),对实验动物无菌手术切取脑组织,测定脑组织含水量,多聚甲醛固定脑组织,跟液氮冷冻,送检标本。2、脑组织含水量测定对不同组别的大鼠,活体经心脏疾速灌注4℃生理盐水250ml至右房流出液变清,敏捷断头取脑。取左半脑,用电子天平称量湿重,80℃电热恒温干燥箱内烘烤72h,称取干重,打算脑组织含水量:BWC=[(湿重一干重)/湿重]X100%。3、免疫组化检测利用免疫组化S-P法,对切取固定的标本进行惯例浸蜡,制造出蜡块,并且进行惯例切片,组织材料脱蜡及水化;克制内源性过氧化物酶活性,PBS洗涤切片;抗原修复,先后滴加一抗跟二抗,滴加S—P试剂,制造切片。倒置显微镜察看AQP-4的表白。利用Imag(文章此处忽略..)epro-plus6.0图像分析软件进行均匀光密度检测。4、免疫印痕技巧技巧检测将取出的脑组织,以无菌pvc管内液氮冷冻,-70℃冰箱保存待测,预冷裂解后,超声粉碎,离心,积淀参加溶膜缓冲液,超声混匀,冰上孵育过夜后离心,取上清分装,酚试剂法测定其蛋白浓度,以牛血清白蛋白为标准品。采取酚试剂法定量蛋白,检测脑组织中的AQP-4含量。5、数据处理利用ChemiImager5500V2.03图象分析软件对western实验成果进行分析。用spss13.0软件包对不同组别的实验数据,采取单因素方差分析,采取p<0.05作为差别存在明显性的标准。假如差别存在明显性,则进行LSD法测验(t测验实现值之间的两两测验),仍然以p<0.05作为差别存在明显性的标准。用spss13.0软件包进行处理。对脑组织含水量跟AQP4的westren数据表白值,采取直线相干分析,以p<0.05作为差别明显性标准。实验成果1、实验动物的生命体征情况心肺复苏各组大鼠窒息至开端心肺复苏的指标一致,经过统计学分析提示其差别不存在明显性(p>0.05),提示自主轮回恢复之前复苏各组大鼠所遭受到的缺血缺氧性侵害程度是基本相同的。2、脑组织含水量测定成果对复苏成功组跟对比组,其脑组织含水量(%)(成功组77.72±0.24,对比组77.74±0.08)差别(本文此处忽略..)不存在明显性(p>0.05),对复苏成功组(77.72±0.24)跟失败组(80.51±0.35)之间,以及复苏失败组(80.51±0.35)跟对比组(77.74±0.08)之间,其差别存在明显性(p<0.05)。3、免疫组化成果通过免疫组化,倒置显微镜镜下察看到AQP4在心肺脑大鼠中,其在复苏成功组跟对比组中的表白相类似,此二者的表白明显少于在复苏失败组中的表白。而通过图像分析体系也提示此二者表白明显少于在复苏失败组中的表白。4、免疫印痕技巧成果通过免疫印痕技巧分析,获得其灰度值后,进行方差分析,提示存在组间差别(F=246.672p<0.05),比较不同组别间的差别,通过LSD统计学分析表明,AQP4的在复苏成功组中的表白明显少于复苏失败组(p<0.05),而与对比组(畸形健康大鼠)的表白类似(p=0.702>0.05)。5、脑组织含水量跟脑组织AQP4表白的相干性分析二者之间通过相干性分析,可能发明此二者存在相干关联(K=1.54b=20.52r=0.872p<0.05)实验论断1、脑组织含水量检测证明复苏失败组的脑组织含水量明显高于畸形对比组跟复苏成功组,其差别存在明显性,提示复苏失败大鼠的脑水肿比较明显。2、免疫组化的成果可能看出,心肺脑复苏成功组的大鼠的脑组织中,AQP4的表白不明显,与畸形对比组(畸形健康大鼠)的表白类似,而在复苏失败组的大鼠中,其表白十明显显。对图像分析体系的均匀光密(此处忽略..)度值,进行统计学分析提示复苏成功组与失败组之间,对比组跟失败组之间AQP4表白差别存在明显性(p<0.05),而复苏成功组跟对比组之间差别不存在明显性(p>0.05)。3、免疫印迹技巧的成果进一步证明了上述论断,水通道蛋白—4在心肺脑复苏中在失败的病例中表白明显,而在复苏成功跟畸形对比组中的表白不明显。4、脑组织含水量测定跟脑组织AQP4的表白程度相干性成果表明,二者之间存在相干关联,浮现线性相干,即在脑组织含水量增加时,AQP4的表白程度也随之回升,阐明脑水肿可能是AQP4的表白所引起。论断:AQP4在心肺脑复苏失败大鼠脑组织中表白明显,与脑水肿程度正相干提示AQP4在心肺脑复苏中对脑组织有侵害作用,可能跟引起脑水肿有关。


以上为本篇毕业论文范文窒息法心肺脑复苏大鼠脑组织含水量跟AQP4表白程度相干性研究的介绍部分。
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