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大鼠骨髓间充质干细胞体外引诱分化为血管平滑肌样细胞的实验研究

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毕业论文范文题目:大鼠骨髓间充质干细胞体外引诱分化为血管平滑肌样细胞的实验研究,论文范文关键词:大鼠骨髓间充质干细胞体外引诱分化为血管平滑肌样细胞的实验研究
大鼠骨髓间充质干细胞体外引诱分化为血管平滑肌样细胞的实验研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目标探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外分别培养以及扩增的方法并鉴定细胞性质。方法取100g左右雄性SD大鼠后肢股骨、胫骨骨髓,原代全骨髓培养法,多次传代纯化,体外扩增后,察看细胞状况,绘制细胞成长曲线,并利用免疫组化及流式细胞学检测培养细胞中CD34、CD90、CD105细胞标记性因子,鉴定原代培养获取的细胞是否为BMSCs。成果原代培养所获取的细胞状况呈长梭形,成长浮现特点性的漩涡状,成长曲线为典范的S型,免疫组化成果显示CD34阴性,CD44阳性,CD54阳性,流式细胞学检测成果显示CD34阴(文章此处忽略..)性,CD90、CD105阳性。论断利用全骨髓培养法可成功分别骨髓间充质干细胞,全骨髓培养较为简便、易行。经传代后细胞纯度增高,10代以内的细胞纯度高,活性好。目标探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)作为构建小口径血管种子细胞的可行性,及其引诱机制。方法取100g左右雄性SD大鼠后肢股骨、胫骨骨髓,原代全骨髓培养法,多次传代纯化,体外扩增后,察看细胞状况,并免疫荧光及流式细胞仪检测CD34、CD90、CD105细胞因子,鉴定是否为BMSCs。将BMSCs分为实验组及对比组:实验组利用含全反式维甲酸及二丁(此处忽略..)酰环磷酸腺苷(db-cAMP)的低糖基本培养基(DMEM-LG)培养基培养;对比组采取个别的DMEM-LG培养基培养。察看引诱后的细胞状况并利用免疫荧光技巧及流式细胞仪检测引诱后第5代细胞平滑肌α-肌动蛋白(SM-α-actin)、钙结合蛋白(calponin)、肌球蛋白重链(SMMHC)的表白情况。成果原代培养所获取的细胞经过多次传代培养后呈长梭形,浮现特点性的漩涡状成长,检测CD34阴性,CD90、CD105阳性。经引诱后的BMSCs成长较迟缓,略呈卵形,检测SM-α-actin、calpon(略..)in、SMMHC明显表白;对比组细胞的状况及成长速度跟BMSCs类似,不表白SM-α-actin、calponin、SMMHC。论断BMSCs在全反式维甲酸的引诱下可向血管平滑肌样细胞表型分化,为组织工程构建小口径血管提供平滑肌种子细胞。目标探讨血管平滑肌样细胞在体外体外静态培养的可能性以及察看细胞成长状况。方法取成年雄性比格犬,处死后,取胸主动脉,长约6cm,并对所取血管行脱细胞实验,获取脱细胞基质支架,并行疾速冰冻染色检查,检测脱细胞后果。将获取的脱细胞基质支(此处忽略..)架材料剪成2x2cm大小的薄片,将引诱实现的血管平滑肌样细胞种植在薄片上,隔日换液,种植15d后将支架薄片行疾速冰冻检查、电子扫描电镜检查,察看细胞成长状况。成果疾速冰冻染色检查可见引诱实现的血管平滑肌样细胞可种植在血管脱细胞基质支架名义成长,电子扫描电镜可见细胞复杂在支架材料上。论断引诱实现的血管平滑肌样细胞可静态种植在血管脱细胞基质材料上。


以上为本篇毕业论文范文大鼠骨髓间充质干细胞体外引诱分化为血管平滑肌样细胞的实验研究的介绍部分。
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