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Cohn组分IV积淀中血浆蛋白的分别工艺及过程主动化研究

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毕业论文范文题目:Cohn组分IV积淀中血浆蛋白的分别工艺及过程主动化研究,论文范文关键词:Cohn组分IV积淀中血浆蛋白的分别工艺及过程主动化研究
Cohn组分IV积淀中血浆蛋白的分别工艺及过程主动化研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:本文研究了从血浆蛋白出产中的放弃物Cohn组分Ⅳ积淀(CohnⅣ积淀)中,分别纯化多种有药用价值血浆蛋白的工艺。重要目标为白蛋白(Albumin,HSA)、运铁蛋白(Transferrin,Tf)、α1-蛋白酶克制剂(α1-antitrypsin,α1-AT)、抗凝血酶-Ⅲ(Antithrombin-Ⅲ,AT-Ⅲ)、结合珠蛋白(Haptoglobin,Hp)等五种血浆蛋白。根据积淀法跟多维层析法相结合的思路,设计分别工艺,(略..)首先对积淀进行预处理,而后通过多维层析技巧,实现了五种蛋白的便捷高效分别,并对其分别过程实现了主动化把持。首先研究CohnⅣ积淀预处理方法,断定用生理盐水溶解,离心跟过滤除去固体助滤剂,再用聚乙二醇(Polyethyleneglycol,PEG)对蛋白溶液进行积淀,除去了分子量较大的蛋白杂质,得到CohnⅣ积淀预处理液。其次研究CohnⅣ积淀预处理液的初步层析方法。比较了其在凝胶过滤层析,疏水层析(本文此处忽略..)跟离子交换层析上的分别后果。实验发明凝胶过滤层析跟离子交换层析对这五种蛋白的分别后果不佳,无奈起到初步筛分作用,而疏水层析的三个洗脱组分中的蛋白成分简单,便于进一步纯化。因此,抉择了OctylSepharose4FastFlow(OctylFF)作为初步层析步骤,断定了阶段洗脱的梯度为:20%、50%、100%,得到三个洗脱组分:第一组分重要含Tf;第二组分重要含α1-AT,Hp跟部分的Tf;第三组分重要含AT-Ⅲ跟HS(文章此处忽略..)A。接下来对疏水层析的三个组分进一步层析纯化。第一组分经过DEAEFastFlow(DEAEFF)纯化,得到Tf产品活性收率为74%。第二组分用DEAEFF分别得到α1-AT产品跟含Hp的组分,该组分再经过凝胶过滤层析得到Hp产品。α1-AT跟Hp活性收率分辨为62%跟40%。第三组分用肝素亲跟HeparinSepharose6FastFlow纯化得AT-Ⅲ跟白蛋白产品,活性收率分辨为65%跟87%。最后利用多维组合层析体系,实现了(本文此处忽略..)这五种蛋白的主动化分别过程,得到的目标蛋白的活性收率如下:HSA为95%,AT-Ⅲ为70%,Tf为80%,α1-AT为65%,Hp为50%。绝对手动操作,各蛋白的活性回收率进步,工艺时光缩短了5倍。该体系是封闭管道联接,由软件主动把持,节俭了人力物力,避免了操作中的传染,减少了蛋白的丧失。


以上为本篇毕业论文范文Cohn组分IV积淀中血浆蛋白的分别工艺及过程主动化研究的介绍部分。
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