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大陆低温碱性蛋白酶的化学特点研究

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毕业论文范文题目：大陆低温碱性蛋白酶的化学特点研究，论文范文关键词：大陆低温碱性蛋白酶的化学特点研究
大陆低温碱性蛋白酶的化学特点研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：本论文对碱性蛋白酶在国内外的研究与进展及目前大陆低温酶的研究状况进行了综述，阐明了大陆低温碱性蛋白酶的研究对公民经济的发展所起的重大作用，并指出了现有研究工作的不足之处跟今后的发展方向。论文首次对一种利用我国大陆嗜极微生物代谢产物并通过古代生物工程手段开发出的一类新型酶——大陆低温碱性蛋白酶(YS-80-122)的化学特点开展研究，通过对其分别纯化与制备工艺的探讨，理化性质跟催化能源学的研究，及利用打算机模建方法对该酶的构造进行猜测，获得了该碱性蛋白酶的各项机能参数跟很多有对于构造与活性核心的有价值信息，为今掉队一步发展该酶的研究与改革、出产与利用奠定实际基本。本文重要发展了以下多少个方面的工作：大陆低温碱性蛋白酶的分别纯化与制备工艺研究：①将该酶的发酵液分辨经过高速冷冻离神思离心(6000转／分，4℃)去（文章此处忽略..）除菌体跟其它有机粘性物质，错流超滤体系(截留分子量10，000Dal)去除小分子量杂质，并经冷冻干燥获得可供产业利用的粗酶；②将上一步经超滤获得的澄清发酵液分辨经过盐析(30％-65％)，等电聚焦制备电泳(12W)，SephacryIS-200凝胶过滤，最后冷冻干燥，获得试剂酶，经反相C8HPLC跟SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱，该酶纯度已达色谱纯及电泳纯。大陆低温碱性蛋白酶的化学性质研究：①该酶经SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳跟HPLC凝胶过滤测得其分子量为49300±1000Dal，经薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦测定酶的等电点为pH8.5，与已知碱性蛋白酶不同，因为其来自于大陆，属于一种新型碱性蛋白酶。②探讨了pH跟温度对酶活性跟牢固性的影响。通过采取两维实验数据成果跟三维数据模仿相结合的手段，打算出酶活方程，r~2＞0.9，求得其反（略..）应最适pH为9.5，最适温度为30℃。在对该酶的pH跟温度牢固性研究中发明，该酶在低温前提下(t≤30℃)存在较好的牢固性，保持绝对低pH(pH≤8)有利于保持酶的牢固，且酶活性随pH跟温度的升高而降落。⑧研究了常见金属离子，增稠剂、名义活性剂跟氧化剂H_2O_2对酶活的影响。研究发明多数的金属离子对该酶不存在克制造用，Pb~(2+)、Ag~+、Cu~(2+)对该酶有较强的克制造用。该酶与常见大陆低沮碱性蛋白醉的化学特点研究的增稠剂、名义活性剂、氧化剂H八有良好的配伍性，其性质非常有利于今后该酶在洗涤行业的进一步开发。但实验也发明，金属鳌合剂如EDTA能重大引起该酶失活，这一性质与以往发明的碱性蛋白酶有很大的不同，这与其独特的活性核心有关。大陆低温碱性蛋白酶的催化能源学研究:①在以酪蛋白为底物的催化反应体系中研究了P（略..）H跟温度对酶催化反应能源学参数的影响。求得其反应活化能Ea=33.ZkJ/mol;反应的温度系数Q:0=10，，‘33f“‘’，、习;pKa=9.3、p介10.7、最适p除10.0，并根据所测的PK值可能推断出该低温碱性蛋白酶的活性部位可能会存在酪氨酸酚轻基或疏基等构造，而不包含a一梭基、a一氨基、门冬氨酸p一梭基、以及谷氨酸丫一竣基等常见氨基酸侧链基团。②EDTA对酶的克制造用研究，通过能源学参数凡的变更，经过打算得到EDTA种酶重要产生“竞争性”克制，所以该酶应当存在某些金属蛋白酶的性质，其活性核心应当包含M扩+，znz十，c尹，Fe2+，cu2+等金属元素，EDTA的参加将金属原子从酶蛋白剥离而引起失活，在实验中发明，参加乙萨+后，失活的酶活性又逐步恢复，因此根据能源学数据推断，ZnZ+是该酶活性核心所包含（本文此处忽略..）的金属元素。大陆低温碱性蛋白酶的同源模建与构造猜测:①用DNASTAR分析此酶得出其分子量为49903.92Dal，等电点PI为8.52，与前面实验基本吻合。此酶含有459个氨基酸。疏水性氨基酸148个，极性氨基酸153个。BLAST同源性分析其与碱性蛋白酶的类似性很高，同源性可达76%，应当存在的碱性蛋白酶性质。②进行构造模建获得构造比较公道的模建成果，显示了锌离子的三个组氨酸残基结合位点，也是其催化位点。与前述实验推断其活性核心应有金属离子ZnZ+存在的成果吻合，表明该模建存在较高的实际价值跟实际意思。

以上为本篇毕业论文范文大陆低温碱性蛋白酶的化学特点研究的介绍部分。

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