脂肪酶产生菌的筛选、酶基因克隆及应用研究

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脂肪酶产生菌的筛选、酶基因克隆及应用研究

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毕业论文范文题目：脂肪酶产生菌的筛选、酶基因克隆及应用研究，论文范文关键词：脂肪酶产生菌的筛选、酶基因克隆及应用研究
脂肪酶产生菌的筛选、酶基因克隆及应用研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：脂肪酶是一种酯键水解酶,它们能够进行非水相催化的特性使其能够用于生产许多高附加值的、用化学方法难以合成的水不溶性产品,目前在非水介质中的脂肪酶催化反应已经被成功应用在多肽合成、聚合物合成、药物合成、立体异构体拆分、精细化工、食品和香料生产及油脂改性等,成为当前生物技术领域的一个研究热点。本论文主要从脂肪酶产生菌的筛选、发酵条件优化、诱变育种、脂肪酶基因的克（文章此处忽略..）隆、脂肪酶在有机相中的催化等几方面进行了研究。本论文首先经过富集、平板初筛及摇瓶复筛试验,筛选到具脂肪酶活的菌株80余株,其中C3酶活较高。C3和G5固定化脂肪酶能够高效催化转酯反应生产生物柴油。通过对C3和G5进行18SrDNA分析,结合形态观察,初步确定此两株菌都属于地霉菌属(Geotrichum)。对C3胞外粗酶液酶基本性质的研究表明:C3脂肪酶胞外粗酶液作用的最适温度为40℃,（此处忽略..）最适作用pH为7.5,在50℃以内和pH6.0～8.0之间有较好的稳定性。随后,对筛选到的C3菌株液体摇瓶产脂肪酶的条件进行了优化。确定其最适产酶条件为:黄豆粉1.5g蛋白胨1.0g硫酸铵0.5g蔗糖1.5gKH2PO40.1gMgSO4·7H2O0.05g橄榄油1mLH_2O100mLpH6.5。然后,用紫外线及EMS对G5进行诱变育种。结果证明EMS诱变效果较好。G5经EMS诱变后传代3次,酶活比出发菌株提高了168.6%。我们根据G（文章此处忽略..）.geotrichum脂肪酶基因核酸序列的保守区域,利用热不对称交错PCR(TAIL-PCR)技术扩增得到了G5脂肪酶基因的全序列,此基因没有内含子,全长1692bp,编码563个氨基酸,对其进行了生物信息学分析。最后,对固定化的G5脂肪酶在有机相中催化转酯化反应进行了尝试,此酶可以转化橄榄油、棉籽油、煎炸废油等多种底物生产生物柴油,对橄榄油的酯化率达到54%。在有机相中还利用此G5脂（本文此处忽略..）肪酶对生物表面活性剂槐糖脂进行了结构修饰,对修饰后的槐糖化酶脂的抑菌活性进行了研究,实验证明,通过修饰提高了其对石膏样毛癣菌和红色毛癣菌的抑制作用,对白色念珠菌有一定抑制作用,对犬小孢子菌的抑制作用改变不大。

以上为本篇毕业论文范文脂肪酶产生菌的筛选、酶基因克隆及应用研究的介绍部分。

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