玉米优良自交系的组织培养和sbeⅡb基因RNAi片段的转化研究

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玉米优良自交系的组织培养和sbeⅡb基因RNAi片段的转化研究

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毕业论文范文题目：玉米优良自交系的组织培养和sbeⅡb基因RNAi片段的转化研究，论文范文关键词：玉米优良自交系的组织培养和sbeⅡb基因RNAi片段的转化研究
玉米优良自交系的组织培养和sbeⅡb基因RNAi片段的转化研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：玉米是重要的粮食、饲料与工业原料作物,长期以来,玉米优良基因型高效再生体系的建立一直是人们研究的热点。同时淀粉是玉米籽粒中最重要的成分,随着玉米淀粉在能源、化工和材料等工业上的广泛应用,改良玉米淀粉品质已成为近年来一个十分重要的目标。本文利用十个常规优良自交系进行再生特性和条件的优化,开展了玉米淀粉分支酶基因的RNAi表达载体的构建以及农杆菌介导的遗传转化研究,获得了如下主要结果:1.选用了生产上广泛应用的十个玉米优良自交系,通过组织培养研究其再生（文章此处忽略..）情况,玉米自交系基因型间的培养能力具有较大的差异,十个玉米自交系都能诱导出初级愈伤组织,但是形成胚性愈伤组织的能力和再生频率上具有很大的差异,其中四个自交系178,鲁原92,黄C,52106能再生出植株,最高再生率分别为78%,45%,26%,20%。2.选用玉米幼胚、成熟胚、胚叶、胚轴、胚根作为外植体,研究不同外植体诱导愈伤及再生能力情况。其中幼胚诱导初级愈伤组织可达100%,胚性愈伤组织诱导率也比较高,可达80%,成熟胚的诱导愈伤能力也比较强,但是形成胚性愈伤的能力较差一些,再生频率只有10%左右,而胚根、（本文此处忽略..）胚叶等诱导愈伤组织比较困难,且其愈伤组织没有胚性,几乎不能分化,分化频率不足1%。3.通过对供试自交系178培养基条件的筛选和优化获得了玉米幼胚合适的诱导培养基为:N6B5+2,4-D2.0mg/L+3%蔗糖;合适的继代培养基为N6B5+2,4-D1.0mg/L+6-BA0.1mg/L+4%蔗糖+L–Pro1000mg/L+CH800mg/L;合适的分化培养基为N6B5+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+3%蔗糖;合适的生根培养基为N6B5+IBA1.0mg/L+3%蔗糖,建立了以幼胚为外植体的再生体系。4.分别从178自交系玉米基因（略..）组中扩增了sbeⅡb基因的第20外显子DNA片段(155bp)和从未成熟种子cDNA中扩增了第21、22外显子DNA片段(280bp),利用pUCCRNAi与pCAMBIA1300载体作为桥梁载体,分别构建了含胚乳特异启动子HMW和潮霉素筛选基因的RNAi表达载体pCAMBIA1300+HMW+2F及含bar筛选基因的RNAi表达载体pCAMBIA1300+bar+HMW+2F。这些载体可用于基因枪和农杆菌介导的玉米转化的研究。5.利用四个获得再生的自交系基因组分别扩增了sbeⅡb基因的第20外显子DNA片段并（文章此处忽略..）进行了测序分析,其中三个自交系鲁原92、178、黄C克隆的片段序列完全一致,52106与之仅有一个碱基的差异,表明选择的干涉片段DNA序列具有高度的保守性,构建的RNAi表达载体可适合不同自交系的遗传转化。

以上为本篇毕业论文范文玉米优良自交系的组织培养和sbeⅡb基因RNAi片段的转化研究的介绍部分。

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