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电融合技术构建高产燃料酒精的菌株及其高密度发酵

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毕业论文范文题目:电融合技术构建高产燃料酒精的菌株及其高密度发酵,论文范文关键词:电融合技术构建高产燃料酒精的菌株及其高密度发酵
电融合技术构建高产燃料酒精的菌株及其高密度发酵毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:为得到既能直接利用木薯淀粉原料又能发酵高产酒精的菌株,本论文对最佳条件下制备的K氏酵母原生质体与黑曲霉(As3.4309)原生质体进行电融合,最终选育出一株性能稳定、高产酒精的融合子,且摸索出该融合子高细胞密度发酵产酒精的工艺验条件。K氏酵母单倍体制备的最佳产孢培养基为:葡萄糖0.1%,酵母膏0.25%,NaAC·3H_2O1.36%,琼脂2%,用HCl调pH值至6.0左右。在该培养基上28℃培养6d,其孢率为78.34%。K氏酵母原生质体形成与再生的优化(此处忽略..)条件为:菌龄8h,经0.1%β-巯基乙醇预处理10min及以0.8mol/L甘露醇为稳定剂,用1.5%蜗牛酶30℃下酶解2h,在该条件下K氏酵母原生质体形成率与再生率分别为72.9%、21.6%。黑曲霉其原生质体再生优化实验条件为:菌龄为12h,1.0%纤维素酶+0.5%蜗牛酶+0.5%溶菌酶,30℃下酶解3h,黑曲霉原生质体再生率达4.2%。K氏酵母原生质体与黑曲霉原生质体紫外单亲灭活后电融合条件为:交变电场频率为1MHz,交变电场强度600v/cm,脉冲电场强度10kv/cm,(本文此处忽略..)脉冲宽度50μs,脉冲个数为5个。经平板初筛和发酵复筛得到一株性能稳定的融合子AK-2。该融合子的对数生长期为9h~21h。融合子AK-2高细胞密度发酵产酒精工艺条件:融合子的发酵培养基为木薯(最佳粉碎度80目,料液比1:3.5,蒸煮温度100℃,蒸煮时间30min,α-淀粉酶添加量15U/g),MgSO_40.03%,KH_2PO_40.05%,CaCl_20.02%,(NH_4)_2SO_40.25%。融合子发酵条件为:转速150r/min,接种量10%,发酵温度32℃,初始pH值4.5;溶氧控制在50%,(此处忽略..)通氧时间控制为15h。在最佳的条件下融合子发酵,酒精度达到10.3%(v/v),细胞密度达到3.4亿/mL(细胞干重为23.8g/L),比优化前细胞密度和酒精产量分别提高了75.6%和17.4%。10L发酵罐中,融合子AK-2高细胞密度发酵产酒精工艺和K氏酵母传统添加糖化酶发酵产酒精工艺进行比较,发现融合子高细胞密度产酒精能力略低于传统发酵工艺,但糖利用率高,残还原糖含量低,不需要糖化工艺,发酵周期缩短,减少了添加酶的成本,同时糖化和发酵在同一(此处忽略..)个反应器中进行,设备投资少,能耗降低,在工艺上有较大的优势。


以上为本篇毕业论文范文电融合技术构建高产燃料酒精的菌株及其高密度发酵的介绍部分。
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