脂肪酶产生菌的细胞融合选育及其产酶条件优化

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脂肪酶产生菌的细胞融合选育及其产酶条件优化

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毕业论文范文题目：脂肪酶产生菌的细胞融合选育及其产酶条件优化，论文范文关键词：脂肪酶产生菌的细胞融合选育及其产酶条件优化
脂肪酶产生菌的细胞融合选育及其产酶条件优化毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：脂肪酶(Lipase)是一种特殊的酯键水解酶,它可作用于甘油三酯的酯键,使甘油三脂降解为甘油二酯、单甘油酯、甘油和脂肪酸。脂肪酶是最早被人们研究的酶类之一,也是一种重要的工业用酶,被广泛应用于轻工领域。微生物脂肪酶被发现以来,由于其种类多,高度的底物专一性,宽范围的作用pH和温度,容易工业化生产应用等优点,选育脂肪酶高产菌株成了国内外相关研究的热点。本文利用化学PEG融合法使白地霉(GeotrichumcandidumNS3)原生质体和假丝酵母(Cand（略..）idavalidaT2)原生质体融合,结合抗药性标记筛选方法,成功筛选出一株产脂肪酶能力较高并且生长能力较强的融合菌株,并对融合株的固态发酵产脂肪酶条件进行初步研究。主要研究工作和结果如下：(1)脂肪酶双亲本菌株抗药性标记的选择。实验利用药物浓度梯度平板法和医学给药原则,选用12种药物分别对白地霉(GeotrichumcandidumNS3)和假丝酵母(CandidavalidaT2)进行抗药性测定,成功筛选出白地霉和假丝酵母的抗药性标记。白地霉抗性而假丝酵母非抗性的（本文此处忽略..）药物标记为曲咪新乳膏浓度为2×103μg/ml,假丝酵母抗性而白地霉非抗性的药物标记则为硫酸铜浓度为2×103μg/ml。(2)双亲本菌株原生质体制备和再生条件的研究。利用单因素实验探讨影响白地霉和假丝酵母原生质体形成率和再生率的各种因素,结果表明制备原生质体的优化条件为：双亲本菌龄为对数生长中期、1.5%的纤维素酶酶解1小时、酶解温度30℃、脱壁促进剂为0.05%的半胱氨酸、渗透压稳定剂为0.7MNaCl。(3)双亲本原生质体融合及融合子的鉴定。利用化学PEG方法使双亲本原生质体融合,通过影（此处忽略..）印法筛选得到50株融合子。连续传代10次,获得8株性状稳定的融合子,再通过油脂同化平板法筛选得到一株融合菌株,命名为CG16。通过比较双亲本及融合子CG16的菌落表型、显微结构,以及对融合子CG16全细胞可溶性蛋白电泳分析,结果表明融合子CG16是由双亲本原生质体融合得到的新菌株。(4)融合子CG16固态发酵生产脂肪酶条件初步优化研究。通过单因素比较实验,对融合子CG16进行了固态发酵培养基成分和发酵培养条件的初步优化。结果表明固态发酵的优化培养基为：12g固体物质(麦麸：大豆粉=3：2),8m（文章此处忽略..）l营养盐溶液(g/L：KH2PO47.07,Na2HPO422.06,MgSO4·7H2O2.0,Na2CO32.0,NaNO37.07);发酵条件为：接种量为2%,30℃,初始pH7.0,培养72h,产酶酶活达到82.22U/g干物质,比亲本假丝酵母和白地霉的产酶活力分别提高了32%和171%。

以上为本篇毕业论文范文脂肪酶产生菌的细胞融合选育及其产酶条件优化的介绍部分。

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