内异消对子宫内膜异位症大鼠血管生成与雌激素的影响研究

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内异消对子宫内膜异位症大鼠血管生成与雌激素的影响研究

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毕业论文范文题目：内异消对子宫内膜异位症大鼠血管生成与雌激素的影响研究，论文范文关键词：内异消对子宫内膜异位症大鼠血管生成与雌激素的影响研究
内异消对子宫内膜异位症大鼠血管生成与雌激素的影响研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：子宫内膜异位症(endometriosis,以下简称内异症)是育龄妇女最常见的疾病,在一般人群中的发病率为10～15%。内异症的发病机制尚不明确，目前主要的治疗方式是采用手术移除异位病灶和雌激素治疗,但这些治疗通常会有副作用大且易复发的缺点。内异消缓释胶囊是本课题组自行研制的抗子宫内膜异位症的中药新药,由川芎嗪、阿魏酸、延胡索乙素组成,其处方与制备工艺已经申报国家技术发明专利。目的本实验主要研究内异消对大鼠子宫内膜异位症模型血管生成与雌激素的影响及相关机制,为将内异消研制成为治疗子宫内膜异位症的中药新药提供试验依据。方法1.造模及模型成功判断标准采用子宫内膜自体移植法建立大鼠子宫内膜异位症模型,以移植物的体积大小、形态及病理检查作为模型成功的依据。以同时符合以下3条标准者为成功模型：①移植物体积增大,被结缔组织或大网膜覆盖并有血管形成,呈隆起透亮的小囊状,出现液体积聚,且积液高度≥2mm；②游标卡尺测量移植物的体积大小,异位组织体积=0.52×长×宽×高,移植物体积≥8mm3；③切取移植物送检,证实移植物中有子宫内膜上皮细胞、腺体及间质的生长。2.分组及给药除正常对照组以外,将造模成功的SD大鼠随机分为模型对照组、孕三烯酮0.5mg·kg-1·d-1组、（此处忽略..）内异消0.045g·kg-1·d-1组,0.09g·kg-1·d-1组,0.18g·kg-1·d-1组,每组各10只,于模型成功后第4d开始灌胃给药,每天1次,连续4wk。3.内异消抑制子宫内膜异位症大鼠血管生成作用观察给药4wk后,择动情期处死大鼠,观察移植物的生长情况,取在位和异位子宫内膜,进行HE染色病理检查观察。免疫组化和WesternBlot方法检测异位内膜组织中微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)和内皮抑素(endostatin)蛋白的表达,放射免疫分析法(RIA)检测大鼠血清和异位内膜组织中前列腺素E2(PGE2)的含量。4.内异消对子宫内膜异位症大鼠雌激素影响的研究参照前面所述方法建立大鼠子宫内膜异位症模型以及进行分组,每组各16只,于模型成功后第4d开始灌胃给药,每天1次,连续10wk。分别于给药第4wk末、10wk末各处死大鼠8只,取大鼠下丘脑、垂体、卵巢、血清、在位和异位子宫内膜。免疫组化检测下丘脑中促性腺激素释放激素(GnRH),垂体中促卵泡激素(FSH)和黄体生成激素(LH),卵巢中雌激素受体(ER)的表达,WesternBlot检测异位内膜组织中ER、热休克蛋白90(HSP90)和环氧合酶-2(COX-2)的表达,化学发光免疫分析法(CLIA)和酶联免疫吸附法(Elisa)分别检测大鼠血清中雌二醇(E2)和孕酮(P（本文此处忽略..）)的含量。结果1.造模结果造模4wk后,择动情期开腹观察移植物生长情况,并用游标卡尺测量移植物大小。结果显示,肉眼观察可见移植物被脂肪组织覆盖并有血管生成,呈隆起透亮或黑色的小囊状,出现液体积聚,体积增大,造模成功率为90.91%；HE染色结果显示模型组大鼠异位内膜组织腺体上皮细胞呈高柱状,排列在囊泡内腔面,细胞核大呈多层细胞排列,而正常对照组子宫内膜细胞呈松散排列,上皮细胞薄。2.内异消抑制子宫内膜异位症大鼠血管生成作用连续给药4wk后,比较给药前后移植物体积大小的变化,结果显示内异消3个剂量组给药后移植物体积比给药前明显减小(P0.01),均能显著抑制异位内膜组织体积的增生；HE染色结果显示内异消组异位内膜腺上皮细胞层明显变薄,细胞呈矮柱状甚至扁平状,单层细胞松散排列。免疫组化和WesternBlot结果显示模型组异位内膜组织中MVD和VEGF蛋白的表达显著高于正常对照组(P0.01),内异消0.09g·kg-1、0.18g·kg-1均能显著降低内异症大鼠MVD和VEGF蛋白的表达(P0.05,P0.01)；模型组异位内膜组织中endostatin蛋白的表达显著低于正常对照组(P0.01),内异消0.18g·kg-1能极显著升高内异症大鼠endostatin蛋白的表达(P0.01)；RIA结果显示模型组大鼠血清（略..）和异位内膜组织中PGE2的含量明显高于正常对照组(P0.01),内异消0.09g·kg-1、0.18g·kg-1均能显著降低内异症大鼠血清和异位内膜组织中PGE2的含量(P0.05,P0.01)。3.内异消对子宫内膜异位症大鼠雌激素的影响连续给药4wk后,免疫组化结果显示模型组大鼠下丘脑中GnRH、垂体中FSH和LH、卵巢中ER的表达极显著高于正常对照组(P0.01)；化学发光法结果显示模型组大鼠血清中E2的含量显著高于正常对照组(P0.01),内异消0.045g·kg-1、0.09g·kg-1、0.18g·kg-1能显著降低大鼠血清中E2的含量(P0.05,P0.01)。连续给药10wk后,免疫组化结果显示模型组大鼠下丘脑中GnRH、垂体中FSH和LH、卵巢中ER的表达极显著高于正常对照组(P0.01),内异消0.09g·kg-1、0.18g·kg-1均能显著降低下丘脑中GnRH的表达、垂体中FSH和LH的表达、卵巢中ER的表达(P0.05,P0.01)；酶联免疫法结果显示模型组大鼠血清中P的含量极显著低于正常对照组(P0.01),内异消0.09g·kg-1、0.18g·kg-1均能显著增高大鼠血清中P的含量(P0.05,P0.01)：免疫组化和WesternBlot结果显示模型组大鼠异位内膜组织中ER,HSP90和COX-2的表达极显著高于正常对照组(P0.01),内异消0.045g·kg-1、0.09g·kg-1、0.18g·kg-1均能显著降低ER（文章此处忽略..）和HSP90蛋白的表达(P0.05,P0.01),内异消0.09g·kg-1、0.18g·kg-1能显著降低COX-2蛋白的表达(P0.05,P0.01)。结论1.内异消具有抗子宫内膜异位症大鼠异位组织血管生成作用,其作用机制与抑制VEGF蛋白表达和促进endostatin蛋白的表达有关。2.内异消能够抑制子宫内膜异位症大鼠下丘脑-垂体-卵巢轴中与激素分泌相关的蛋白的表达,显著降低子宫内膜异位症大鼠血清中E2的含量,显著升高P的含量,在异位病灶处抑制雌激素的表达,从而达到降低雌激素生成。

以上为本篇毕业论文范文内异消对子宫内膜异位症大鼠血管生成与雌激素的影响研究的介绍部分。

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