5-硝基-2-呋喃醛，氯丙嗪和沙丁胺醇的酶联免疫吸附检测法的研究

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5-硝基-2-呋喃醛，氯丙嗪和沙丁胺醇的酶联免疫吸附检测法的研究

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毕业论文范文题目：5-硝基-2-呋喃醛，氯丙嗪和沙丁胺醇的酶联免疫吸附检测法的研究，论文范文关键词：5-硝基-2-呋喃醛，氯丙嗪和沙丁胺醇的酶联免疫吸附检测法的研究
5-硝基-2-呋喃醛，氯丙嗪和沙丁胺醇的酶联免疫吸附检测法的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：随着生活水平的提高,人们对动物源性食品的需求越来越大,在经济利益的驱动下,养殖业中非法添加兽药的现象越来越多。含有四氢呋喃环的硝基呋喃类药物、含有吩噻嗪环的镇定剂类药物和含有羟基苯环的β-兴奋剂药物因为其价格低廉,效果良好,被广泛应用于畜禽和水产养殖业。这些药物的残留可能会导致人体致癌,致突变等作用,甚至引起细菌耐药性的增加,通过食物链的作用间接造成危害。为了保障消费者的生命安全,很多国家和地区建立了一些药物残留的检测方法,包括HPLC、LC-MS、GC-MS等。但是因为这些方法的仪器设备昂贵、样品处理复杂、费时费力等原因,不容易普及。酶联免疫检测法(ELISA)是一种快速、灵敏、方便、易普及的检测方法,有着广阔的发展前景。化学发光酶（文章此处忽略..）联免疫检测法(CL-ELISA)是在酶联免疫检测法的基础上结合了化学发光分析,具有更灵敏和线性范围更宽等优点。本研究旨在建立硝基呋喃醛和氯丙嗪的酶联免疫吸附检测法,以及沙丁胺醇的化学发光酶联免疫吸附检测法。对于5-硝基-2-呋喃醛,利用混合酸酐法合成的免疫原,先将硝基呋喃醛先与对氨基苯甲酸偶连,得到衍生物,然后利用混合酸酐法与EDC法与活化的牛血清白蛋白(cBSA)偶联合成了免疫原。同时,也利用同样的方法将衍生物与卵清蛋白(OVA)偶联合成了包被抗原。用合成的免疫原免疫新西兰大白兔制得多克隆抗体。用间接竞争ELISA法检测结果如下：IC50是6.8ng／mL,检测限为0.2ng／mL。这个结果跟文献中用ELISA法检测呋喃唑酮多克隆抗体一致。对于氯丙嗪,其免（略..）疫原是用混合酸酐法合成,包被抗原用DCC法来合成。先用乙酰丙嗪与盐酸羟胺反应,再用酸酐活化生成半抗原。半抗原与氯甲酸酯反应后,用混合酸酐法与活化的牛血清白蛋白(cBSA)偶联合成了免疫原,用DCC方法与卵清蛋白(OVA)偶联合成了包被抗原。用免疫原免疫小鼠,按照制取单克隆抗体的一般步骤制得抗体。获取的氯丙嗪抗体用间接竞争ELISA法检测结果如下：IC50为0.73ng／mL,而文献报道的ELISA法得到的IC50是20ng／ml。该抗体除对乙酰丙嗪的交叉反应比较明显外,和其他药物的交叉率均很小。用此抗体检测氯丙嗪在猪肉产品的添加回收率,回收率范围在86.2-95.6%之间。批间变异系数在9.7-12.6%之间,批内变异系数在11.0-13.5%之间。鸡肉产品的添加回收率范围在88.9-94.1%之间,。批间变（本文此处忽略..）异系数在10.6-13.0%之间,批内变异系数在11.3-15.3%之间。对于沙丁胺醇,其免疫原由对氨基苯甲酸法制备,包被抗原由盐酸克伦特罗和卵清蛋白制备。其抗体用间接竞争化学发光ELISA法检测结果如下：IC50为0.45ng／mL,而普通ELISA法得到的IC50是8.5ng／mL。该抗体除了与克伦特罗有明显交叉外,与其他β—兴奋剂药物的交叉反应均很小。用此抗体检测沙丁胺醇在猪尿样品中的添加回收率,批间回收率范围在86-112%之间,批内回收率范围在82-105%之间。批间变异系数在5-24%之间,批内变异系数在4-18%之间。通过对硝基呋喃类和氟喹诺酮类药物的研究,我们成功地制备了5-硝基-2-呋喃醛,氯丙嗪和沙丁胺醇的免疫原及包被抗原,并通过动物免疫制备了相应的多克隆抗体和单克隆抗体。同时,我们建立了5-硝基-2-（文章此处忽略..）呋喃醛,氯丙嗪和沙丁胺醇的联免疫吸附检测法,并且与相关文献报道做了一定的比较。在前人研究的基础上,我们的研究取得了新的进展,特别是：第一次制备了氯丙嗪的单克隆抗体,并建立了对应的检测法；开发出了沙丁胺醇化学发光酶联免疫检测法,该法有着更好的灵敏度。本论文为商品化的检测试剂盒的开发,为酶联免疫吸附的检测方法的发展,打下了良好的实验基础,提供了一定的理论依据。本文的研究成果对其他药物抗体的制备和检测试剂盒的开发也有一定的借鉴作用。

以上为本篇毕业论文范文5-硝基-2-呋喃醛，氯丙嗪和沙丁胺醇的酶联免疫吸附检测法的研究的介绍部分。

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