心肌细胞共培养诱导骨髓基质干细胞分化为心肌细胞的研究

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心肌细胞共培养诱导骨髓基质干细胞分化为心肌细胞的研究

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毕业论文范文题目：心肌细胞共培养诱导骨髓基质干细胞分化为心肌细胞的研究，论文范文关键词：心肌细胞共培养诱导骨髓基质干细胞分化为心肌细胞的研究
心肌细胞共培养诱导骨髓基质干细胞分化为心肌细胞的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的骨髓中存在一定数量的骨髓基质干细胞(BMSCs,bonemarrowstromalstemcells),这些细胞具有自我复制能力和巨大的分化潜能,在不同的条件下,可分化为骨、软骨、神经、心肌和脂肪等中胚层来源的组织。有研究结果表明,胞嘧啶类化学物质5-氮胞苷可诱导骨髓基质干细胞向心肌细胞分化,这使BMSCs成为细胞移植治疗缺血性心肌病最有前途的细胞之一。本实验旨在通过对大鼠骨髓基质干细胞进行体外分离、培养、动态观察BMSCs的生长特点;观察在不经过任何诱导,将扩增的BMSCs与心肌细胞共同培养,观察BMSCs分化为心肌细胞的能力。并且通过GFP质粒转染骨髓基质（本文此处忽略..）干细胞,观察GFP在标记BMSCs中的表达能力,以期进一步了解骨髓基质干细胞的生物学特性,为其应用于临床提供更可靠的理论依据。实验方法1.全骨髓贴壁培养法体外分离,培养大鼠骨髓基质干细胞,倒置相差显微镜下逐日观察细胞形态及生长状。2.差速贴壁法体外分离,培养心肌细胞,倒置相差显微镜下逐日观察细胞形态及生长状况。3.将提取的GFP质粒转染培养好的第3代骨髓基质干细胞,Olympus荧光显微镜下观察细胞的转染效率。4.将转染后的骨髓基质干细胞离心收集后按1∶3的比例加入到培养好的心肌细胞中共培养,Olympus荧光显微镜逐日观察细胞变化。实验结果1.大鼠骨髓基质干细胞的形态学观（文章此处忽略..）察:骨髓基质干细胞接种于培养瓶中后24h用倒置显微镜观察大部分细胞已贴壁,贴壁生长的细胞以分散、克隆集落的方式增殖,细胞大多呈梭形,类似成纤维细胞,偶有宽大平坦的多角形细胞。7-10d后克隆集落逐渐增多,随着集落生长的不断扩大,细胞融合。传代培养后细胞不再以集落方式生长,而呈分布均匀的纺锤形细胞生长。2、心肌细胞的形态学观察:心肌细胞一般在24h后会自动从组织块周围迁出,刚开始从组织块中迁出时,心肌细胞呈现梭形,伴随着迁出细胞的增多,组织块周围的心肌细胞呈现出不规则的圆形、三角形。细胞间紧密连接,整体形如铺路石样,随着细胞生长密度的不断增加,细胞间伸出的伪足会交织成网状。有（此处忽略..）时一些细胞紧密结合形成细胞簇,呈现出放射状或同心圆状,经过2～3d培养,这些细胞簇会自发地搏动。3、GFP转染骨髓基质干细胞的结果:转染GFP后,细胞仍贴壁生长,呈梭形或多角形,仍分裂增殖,但增殖速度有所降低。荧光显微镜下,24h可见有绿色荧光表达,但数量较少,强度较低,48h可见细胞发出强烈的荧光。4、共培养后BMSCs形态学与生长行为变化:在共培养后,BMSCs增殖速度缓慢,并且容易变成多角形或扁平,随着共培养时间的延长,有相当数量的BMSCs发生细胞崩解等死亡现象。24h后发现有很多贴壁的未跳动的尖梭形细胞靠近搏动的心肌细胞;48h后,这些尖梭形细胞呈集落样生长,并且在荧光显（略..）微镜下观察到个别被标记的BMSCs呈肌管样结构,这些BMSCs通常靠近搏动的未标记的心肌细胞;在第4天,部分与心肌细胞接触的被标记的BMSCs开始呈微弱心肌样搏动。同时,也有些BMSCs开始死亡,至64h已有相当一部分BMSCs发生死亡。结论1.可以从大鼠骨髓中分离出骨髓基质干细胞,经体外培养可大量扩增。2.GFP转染BMSC后可以长期高效表达,而且对宿主细胞毒性很小,是一个非常理想的组织工程种子细胞的示踪工具。3.大鼠骨髓基质干细胞在不用诱导剂的情况下,与心肌细胞共培养后可以分化为心肌细胞。

以上为本篇毕业论文范文心肌细胞共培养诱导骨髓基质干细胞分化为心肌细胞的研究的介绍部分。

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