1，25-二羟基维生素D_3对慢性实验性结肠炎小鼠Th1、Th17活化的影响

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1，25-二羟基维生素D_3对慢性实验性结肠炎小鼠Th1、Th17活化的影响

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毕业论文范文题目：1，25-二羟基维生素D_3对慢性实验性结肠炎小鼠Th1、Th17活化的影响，论文范文关键词：1，25-二羟基维生素D_3对慢性实验性结肠炎小鼠Th1、Th17活化的影响
1，25-二羟基维生素D_3对慢性实验性结肠炎小鼠Th1、Th17活化的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)是炎症性肠病(inflammatoryboweldisease,IBD)的一种，其发病机制尚不十分明确，一般认为是由包括感染在内的环境因素作用于易感倾向个体，诱发异常免疫反应所致。大量研究表明，免疫因素是其最基本的发病机制。CD4+T细胞的T辅助(Thelper,Th)1/Th17细胞具有促炎症生成的特点，在UC肠道免疫反应过程中的作用越来越得到重视。在各种抗原的刺激下，Th1/Th17细胞的特异转录因子被激活，介导其发生免疫应答，继而分泌相关的细胞因子，如干扰素(interferon-γ,IFN-γ)，白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)，白介素-17(interleukin-17,IL-17)等，这些细胞因子具有强大的募集和激活嗜中性粒细胞、调节细胞免疫应答、清除细胞内的病原体和诱导T细胞活化等功能，进而诱导并促进炎症的发生，最终启动UC的发病。1,25-二羟基维生素D3(1,25-dihydroxyvitaminD3,1,25(OH)_2D_3)是维生素D(VitaminD,VitD)的活性代谢产物，属于开环甾类化合物激素。1,25(OH)_2D_3除了调节钙和骨的代谢外，因免疫细胞中存在其受体(vitamineDreceptor,VDR)，故具有其相关的生物活性。维生素D通过与单个核细胞、巨噬细胞及致敏淋巴细胞等免疫细胞表面的VDR结合调节Th细胞，尤其是Th1/Th17细胞的功能，进而抑制自身免疫性疾病的发展。VitD产生和/或作用不足参与粘膜损伤的发生，使消化道感染的风险增高，增加UC发病的危险。大量研究表明，VitD缺乏与UC的发病有关，补充VitD可以降低UC的发病率。目的：探讨VitD对右旋葡聚糖硫酸钠(dextransodiumsulfate,DSS)诱导的慢性实验性结肠炎的治疗作用及其作用机制，以期为临床UC的维持治疗提供一种新的有效药物。方法：①30只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表随机分入Control组、DSS组和DSS+VD组，每组10只。Control组一直饮用蒸馏水；DSS组和DSS+VD组间断饮用2%DSS，时间段为分别为第1～5天、第8～12天、第15～19天、第22～26天、第27和第28天，其余时间饮用蒸馏水。造模第14天起开始治疗：DSS+VD组给予1,25(OH)_2D_3(0.2μg/25g（略..）/天)灌胃，治疗14天；Control组与DSS组给予等体积PBS灌胃14天作为对照，第29天处死小鼠。②每天观察小鼠精神状态、体重变化、活动情况、毛发光泽度、进食以及大便性状，并评估疾病活动指数(diseaseactivityindex,DAI)。③观察结肠形态学变化，测量结肠长度，并计算结肠的形态学和病理学评分。④检测结肠组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)的含量。⑤检测各组小鼠血清钙的水平。⑥提取肠系膜淋巴结(mesentericlymphnodes,MLN)中的单个核细胞并计数，应用ELISA检测其上清液中的IL-17、TNF-α、IL-6和IFN-γ的水平。⑦应用HE染色观察结肠组织的病理学改变。⑦应用免疫组织化学染色、Westernblot技术和real-timeQ-PCR技术分别检测结肠组织中IL-17、TNF-α、IL-6和IFN-γ蛋白及mRNA的表达水平。结果：①在慢性实验性结肠炎小鼠模型中，与Control组相比较，DSS组小鼠体重明显下降(15.5%±1.50%vs0.0%±0.0%,P0.05)，而DSS＋VD组小鼠体重较DSS组显著回升(5.2%±0.53%vs19.6%±1.82%,P0.05)；与Control组相比，DSS组动物DAI评分显著增加(3.77±0.36vs0.00±0.00,P0.05)，经过治疗后，DSS＋VD组DAI评分显著降低(1.79±0.19vs3.77±0.36,P0.05)。②与Control组相比，DSS组小鼠结肠长度显著缩短(4.35cm±0.48cmvs5.98cm±0.44cm,P0.05)，结肠壁充血、水肿明显，形态学评分升高(2.50±0.58vs0.00±0.00,P0.05)，结肠病理学观察显示黏膜上皮缺损，浅溃疡生成，腺体破坏或消失，可见黏膜层、黏膜下层甚至肌层有大量炎症细胞浸润，病理评分显著增加(9.80±1.26vs0.00±0.00,P0.05)；而经过治疗后，DSS＋VD组结肠长度显著增加(3.78cm±0.89cmvs4.35cm±0.48cm,P0.01)，病理评分较DSS组显著降低(7.00±0.82vs9.80±1.26,P0.05)，结肠壁充血、水肿明显减轻(1.50±0.58vs2.50±0.58,P0.05)，结肠组织病理切片结果提示黏膜上皮相对完整，无溃疡生成，炎症细胞浸润明显减少。③与Control组相比，DSS组结肠MPO活性升高(1.30U/g±0.09U/gvs0.18U/g±0.01U/g,P0.05)，而经过治疗后，DSS＋VD组MPO活性显著降低(0.41U/g±0.03U/gvs1.30U/g±0.09U/g,P0.05)。④血钙检测结果显示，Control组、DSS组和DSS+VD组（略..）血钙的浓度分别为2.50±0.03mmol/L，2.33±0.06mmol/L，3.33±0.32mmol/L，各组间比较均无统计学意义，P0.05。⑤DSS组MLN中的单个核细胞数显著多于Control组(6.56×10~6±0.06×10~6/mLvs1.63×10~6±0.27×10~6/mL,P0.01)，经过治疗后，DSS+VD组细胞数显著下降(3.51×10~6/mL±0.18×10~6/mLvs6.56×10~6±0.06×10~6/mL,P0.01)。ELISA检测MLN单个核细胞上清液中IL-17、TNF-α、IFN-γ和IL-6的水平显示：Control组MLN单个核细胞未经刺激前IL-17、TNF-α、IFN-γ和IL-6的分泌水平为(IL-17:0.22ng/mL±0.04ng/mL,TNF-α:0.046ng/mL±0.004ng/mL,IFN-γ:0.02ng/mL±0.01ng/mL,IL-6:0.012ng/mL±0.01ng/mL)，经CD3/CD28刺激后上述因子的水平都显著增高(IL-17:1.85ng/mL±0.14ng/mL,TNF-α:0.068ng/mL±0.006ng/mL,IFN-γ:1.43ng/mL±0.15ng/mL,IL-6:0.15ng/mL±0.01ng/mL,P0.01)，与Control组相比，DSS组小鼠MLN单个核细胞刺激前IL-17、TNF-α、IFN-γ和IL-6分泌水平(IL-17:0.58ng/mL±0.10ng/mL,TNF-α:0.17ng/mL±0.02ng/mL,IFN-γ:0.61ng/mL±0.12ng/mL,IL-6:0.14ng/mL±0.01ng/mL,P＜0.01)与CD3/CD28刺激后的分泌水平(IL-17:12.23ng/mL±1.03ng/mL,TNF-α:0.35ng/mL±0.04ng/mL,IFN-γ:6.67ng/mL±0.46ng/mL,IL-6:0.47ng/mL±0.06ng/mL,P＜0.01)均显著高于Control组，给予1,25(OH)_2D_3治疗后，未刺激的DSS+VD组小鼠MLN单个核细胞分泌的细胞因子水平较DSS组明显降低(IL-17:0.38ng/mL±0.04ng/mLvs0.58ng/mL±0.10ng/mL,TNF-α:0.13ng/mL±0.01ng/mLvs0.17ng/mL±0.02ng/mL,IFN-γ:0.41ng/mL±0.13ng/mLvs0.61ng/mL±0.12ng/mL,IL-6:0.07ng/mL±0.01ng/mLvs0.14ng/mL±0.01ng/mL,P＜0.01)，同样CD3/CD28刺激后IL-17、TNF-α、IFN-γ和IL-6的分泌水平较DSS组也明显降低(IL-17:6.35ng/mL±0.34ng/mLvs12.23ng/mL±1.03ng/mL,TNF-α:0.24ng/mL±0.02ng/mLvs0.35ng/m（文章此处忽略..）L±0.04ng/mL,IFN-γ:4.45ng/mL±0.41ng/mLvs6.67ng/mL±0.46ng/mL,IL-6:0.43ng/mL±0.04ng/mLvs0.47ng/mL±0.06ng/mL,P＜0.01)。⑥免疫组织化学染色可见：在Control组，炎症因子IFN-γ、TNF-α、IL-17和IL-6仅有少量表达，DSS组小鼠结肠组织中上述4中蛋白表达水平较Control组显著增加(IL-17:0.70±0.10vs0.17±0.05,P0.05;TNF-α:0.85±0.10vs0.25±0.05,P0.05;IL-6:0.65±0.07vs0.10±0.01,P0.05;IFN-γ:0.90±0.10vs0.20±0.05,P0.05)，经过治疗后，DSS+VD组的表达水平较DSS组显著下降(IL-17:0.40±0.08vs0.70±0.10,P0.05;TNF-α:0.35±0.08vs0.85±0.10,P0.05;IL-6:0.30±0.02vs0.65±0.07,P0.05;IFN-γ:0.45±0.07vs0.90±0.10,P0.05)。⑦Westernblot和real-timeQ-PCR检测结果显示，与Control组比较，DSS组结肠组织中IL-17、TNF-α、IL-6和IFN-γ蛋白(IL-17:1.81±0.10vs1.21±0.05;TNF-α:1.79±0.10vs1.04±0.05,P0.05;IL-6:1.75±0.13vs1.00±0.05,P0.05;IFN-γ:2.06±0.10vs1.32±0.05,P0.05)及mRNA的表达水平显著升高(IL-17mRNA:1.91±0.86vs1.00±0.00,P0.05;TNF-αmRNA:1.94±0.64vs1.00±0.00,P0.05;IL-6mRNA:2.04±0.02vs1.00±0.00,P0.05;IFN-γmRNA:2.11±0.11vs1.00±0.00,P0.05)。经过治疗之后，IL-17、TNF-α、IL-6和IFN-γ蛋白(IL-17:1.48±0.08vs1.81±0.10,P0.05;TNF-α:1.44±0.08vs1.79±0.10,P0.05;IL-6:1.34±0.11vs1.75±0.13,P0.05;IFN-γ:1.73±0.07vs2.06±0.10,P0.05)及mRNA的表达均显著下降(IL-17mRNA:1.56±0.30vs1.91±0.86,P0.05;TNF-αmRNA:1.39±0.67vs1.94±0.64,P0.05;IL-6mRNA:1.33±0.01vs2.04±0.02,P0.05;IFN-γmRNA:1.72±0.40vs2.11±0.11,P0.05)。结论：1,25(OH)_2D_3对慢性实验性结肠炎小鼠具有保护作用，其机制可能是抑制了Th1/Th17细胞的活化，下调了相关炎症因子的表达。

以上为本篇毕业论文范文1，25-二羟基维生素D_3对慢性实验性结肠炎小鼠Th1、Th17活化的影响的介绍部分。

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