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胚胎干细胞的分离培养及定向分化研究

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毕业论文范文题目:胚胎干细胞的分离培养及定向分化研究,论文范文关键词:胚胎干细胞的分离培养及定向分化研究
胚胎干细胞的分离培养及定向分化研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:自1981年首个胚胎干细胞建系以来,世界各国的科学家纷纷投身到该研究领域。1998年,美国的两个科学家小组分别从人体外受精发育而成的囊胚内细胞团和5~9周龄流产的胚胎原始生殖嵴中,成功获得了人类胚胎干细胞系和人类生殖嵴干细胞系。干细胞的发现为研究细胞分化、动物发育、建立相关研究模型、阐明基因功能等开辟了广阔的空间。本实验也在人类胚胎生殖嵴干细胞、小鼠胚胎干细胞的分离培养(略..),以及小鼠胚胎干细胞的定向分化等方面进行了研究。实验一是有关人类胚胎生殖嵴干细胞的分离培养。从4—8周的流产胎儿的原始生殖嵴部位分离到原始生殖细胞,经过机械和化学方法的解离后培养于事先用丝裂霉素处理过的小鼠胚胎成纤维细胞或人胚胎成纤维细胞饲养层上,培养基中添加了LIF,bFGEF,Foskolin等细胞因子,此后大约每7天左右传代一次。在实验中,几个适龄的(此处忽略..)胚胎的原代培养物中都出现了鸟巢状的EG细胞集落,维持时间最长的一个胚胎细胞株在传代培养了9代之后仍然可以观察到EG细胞集落。碱性磷酸酶(AKP)活性检测结果证实了这些细胞集落确实具有原始生殖嵴干细胞的特性。实验二是关于小鼠胚胎干细胞的分离培养。从怀孕3.5天的小鼠子宫中取出发育至囊胚期的受精卵,培养于事先用丝裂霉素处理过的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上。囊胚一般在(本文此处忽略..)48小时后贴壁并脱去透明带,由囊胚中的内细胞团增殖形成一个胚胎干细胞球,待其生长至一定程度后对其进行酶解传代,在传代后的细胞中重新生成ES集落形态的细胞集落,在集落生长至一定程度后再进行传代,此后大约每5—7天传代一次。其间对此类细胞集落的AKP检测证实了其胚胎干细胞特性。本实验中的小鼠胚胎ES细胞再传至第九代后逐渐消失。实验三首先建立了一个小鼠胚胎干细胞定(略..)向分化成心肌细胞的实验平台,然后采用了3种心肌疾病相关的药物:黄芑生脉饮、1,6二磷酸果糖和HG(代号),在此定向分化的实验平台上进行了一系列浓度的药物筛选,实验采用视黄酸和DMSO的混合诱导剂作为阳性对照。其中药物HG在适当的浓度下对胚胎干细胞定向发育成心肌细胞表现出强烈的诱导作用(43.3%)。


以上为本篇毕业论文范文胚胎干细胞的分离培养及定向分化研究的介绍部分。
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