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肾移植受者BK病毒的检测及感染危险因素分析

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毕业论文范文题目:肾移植受者BK病毒的检测及感染危险因素分析,论文范文关键词:肾移植受者BK病毒的检测及感染危险因素分析
肾移植受者BK病毒的检测及感染危险因素分析毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目的:本研究目的在于通过对临床患者尿脱落细胞检查、血样及尿样标本Real-timePCR检测,探讨并掌握BKV的检测方法,初步了解肾移植术后患者BKV感染的情况,患者特征,筛选导致其感染复发可能的危险因素,对其移植肾的长期存活率做出预测。方法:1、实时荧光定量PCR外参照系和标准曲线的合成:查阅文献并设计反应引物,确定反应体系,化学合成BK病毒阳性模板,通过PCR扩增鉴定、DNA片段的提取和纯化、重组连接P载体、转化入大肠杆菌DH5α感受态细胞中、进行菌群的阳性克隆鉴定、提取重组质粒并进行(此处忽略..)梯度稀释,RT-PCR反应绘制标准曲线;2、选择2005年1月-2009年2月肾移植术受者113例作为受试对象,留取外周血和尿液标本,行尿脱落细胞检查并分别提取血样DNA和尿样DNA,进行RT-PCR反应,按照PCR检测结果将试验对象分为BKV血尿双阴性组、尿液单阳性组、血尿双阳性组,明确试验对象的BKV感染情况,将试验数据进行统计学分析。结果:经过RT-PCR反应和标准曲线的绘制,证实所合成引物、探针、目的片段之间可正常互补结合。重组质粒经酶切后浓度梯度稀释可得到图像较好的标准曲线。PCR反应检测BKV灵敏度下(略..)限为2.14×10~2copis/ul模板浓度,引物和探针具有BKV特异性。113例肾移植术后患者经尿脱落细胞学检查、血样DNA和尿样DNART-PCR检测,Decoy细胞检出率为23.9%,尿液BKVRT-PCR阳性率约为22.12%;血液RT-PCR反应阳性率为5.30%,。比较血尿双阴性组、尿液单阳性组、血尿双阳性组三个组别之间的临床资料,得出血尿双阴性组同其他两组相比在移植术前血液透析时间方面较短,术后肺部感染发生率较低,均存在显著性差异;而三组在患者年龄、性别、冷缺血时间、尸体供肾/活体供肾、DGF、是否应用免疫诱导治(本文此处忽略..)疗、免疫抑制剂维持治疗方案、急性排斥反应方面无显著性差异。计算不同组别的30dCRR值,按照≤67%或>67%归类并进行等级资料秩和检验,三个组两两比较P值均大于0.05,组间无统计学差异。结论:通过实验我们确立并掌握了BKV病毒的检测方法,并对临床部分肾移植术后患者进行了检测。从检测结果来看,尿液脱落细胞检查可作为临床BKV感染初步筛选方法,阴性预测率较高,但阳性预测率低,容易出现假阴性的结果,不可作为BKV感染的诊断手段。尿液样本和血液样本RT-PCR反应可作为诊断BKV感染的高灵敏度和特异性的手段,还(文章此处忽略..)可显示患者的病毒感染复制程度。移植术后患者的一般情况、冷缺血时间、尸体供肾/活体供肾、DGF、是否应用免疫诱导治疗、免疫抑制剂维持治疗方案、急性排斥反应并不是引起BKV感染复制的危险因素,而移植术前血液透析时间与移植术后肺部感染则与BKV感染复发具有相关性。当不合并BKVN(BKvirusnephritis)时,尚无根据表明单纯的血液或尿液BKV感染检测阳性可能影响移植肾长期存活率。


以上为本篇毕业论文范文肾移植受者BK病毒的检测及感染危险因素分析的介绍部分。
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