H3N2亚型猪流感病毒生物学特性和HA、NA、NS基因特性的研究

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H3N2亚型猪流感病毒生物学特性和HA、NA、NS基因特性的研究

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毕业论文范文题目：H3N2亚型猪流感病毒生物学特性和HA、NA、NS基因特性的研究，论文范文关键词：H3N2亚型猪流感病毒生物学特性和HA、NA、NS基因特性的研究
H3N2亚型猪流感病毒生物学特性和HA、NA、NS基因特性的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：本实验对2004年广东省部分地区出现呼吸道症状的猪群或病死猪的鼻拭子和病变肺脏进行了猪流感病毒(SIV)的分离鉴定。所采病料匀浆灭菌,接种SPF鸡胚扩增培养并且传代,收获鸡胚尿囊液。利用猪流感标准诊断试剂,用血凝和血凝抑制试验检测病毒并且鉴定分离毒株病毒亚型为H3亚型SIV。对所分离到的6株H3亚型SIV分离株进行了生物学特性测定,分离毒株红细胞凝集谱广泛,血凝素对热不稳定,对鸡胚表现较高的致病性,能够（略..）感染小白鼠并表现典型的呼吸道症状和眼观病变。应用PrimerPremier5.0引物设计分析软件设计H3N2亚型SIVHA、NA、NS、NS1基因片段的特异性PCR引物。分别从6株H3亚型SIV分离株感染的SPF鸡胚尿囊液中直接提取核酸。通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增各个毒株的HA、NA、NS基因片段,PCR产物经分离纯化后克隆到pMD18-T载体中,重组质粒经PCR鉴定纯化后再送测序公（本文此处忽略..）司进行序列测定,然后应用DNAStar软件进行序列的拼接、序列信息编辑和分析。同时从GenBank中下载了H3N2亚型猪流感各时间和地域的代表株,分析6个毒株3个基因片段的核苷酸和氨基酸的序列,以阐明广东地区H3N2亚型SIV分离株的基因来源和遗传衍化规律。结果6个病毒同源性很高,在HA裂解位点处的氨基酸序列均为PEKQTR*G,不属于高致病性流感病毒。它们的3个基因与1999年以后香港猪群中流行的流感和2000年以后（文章此处忽略..）北美流行的H3N2亚型流感毒株关系密切。根据序列分析结果选择其中一个SIV分离株进行非结构蛋白基因的重组质粒pMD18T-NS中的NS1基因片段的亚克隆。再将其插入表达载体pET28a中进行基因重组和大肠杆菌诱导表达。构建出了H3亚型SIVNS1基因的重组表达载体,初步建立了NS1基因在大肠杆菌的表达条件。为NS1基因蛋白的大量诱导表达及其下游工作做好了准备。总之,本研究系统地阐明了目前广东地区H3N2亚型SI（此处忽略..）V分离株的生物学特性、基因来源、分子遗传衍化情况和NS1基因的表达条件,为今后H3N2亚型SIV的进一步研究以及猪流感的诊断和防制奠定了基础,为中国乃至全球(人)流感疫情发生的可能性和发展趋势的研究提供一定的理论依据。本研究无论是在病毒学,还是在兽医学等学科上都有重要的学术意义。

以上为本篇毕业论文范文H3N2亚型猪流感病毒生物学特性和HA、NA、NS基因特性的研究的介绍部分。

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