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鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及其遗传变异分析

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毕业论文范文题目:鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及其遗传变异分析,论文范文关键词:鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及其遗传变异分析
鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及其遗传变异分析毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:本研究从河北、北京、天津等发病鸡群中分离到8株新城疫病毒,其代号分别为TJ/99、SJZ/99、YQ/01、TS/01、ZD-1/02、ZD-2/02、ZD-3/03、BT/03,经鸡胚终点稀释法克隆纯化后,对其进行了形态学观察和毒力指数(MDT、ICPI、IVPI)测定。电镜观察可见8株分离株呈圆形、线形和不规则形,病毒粒子表面有纤突样结构,各毒株大小不同,粒子直径或长轴在100~500nm之间。毒力指数测定结果显示,8株NDV的MDT在42.9~49.5h之间,ICPI在1.93-2.00之间,IVPI在2.68~2.89之间,表明8株NDV均为新城疫病毒强毒株。对上述8株分离株以及LaSota、F_(48)E_8、SF、BJ、QH_8/79、SH_7/99等共14株NDV的F蛋白裂解位点附近的基因进行了克隆和同源性分析。结果发现:(1)疫苗用(文章此处忽略..)毒LaSota株同其它13种强毒株之间的同源性在85.0%~89.8%之间,普遍较低;国内标准强毒F_(48)E_8株与LaSota株及国内分离毒株的同源性在90%左右(89.1%~90.4%);国内分离株之间的同源性在88.2%~99.4%之间,不同毒株之间的同源性有高有低。(2)F_(48)E_8株F蛋白的裂解位点为~(112)RRQRRF~(117),而其它12株强毒株F蛋白的裂解位点为~(112)RRQKRF~(117),符合强毒株裂解位点的特征,同毒力测定结果相一致。应用DNAStar软件对上述克隆测序的14株NDV及从Genebank上下载的国内外有代表性的33株NDV等共47株NDV的F基因233bp(157~389bp)长度的核苷酸片段及其相应的氨基酸序列(53~130位氨基酸残基)进行了比较,建立了系统发育树,并确定了8个分离株及SF、BJ株的基因型。结果表明:(1)所有(略..)NDV分离毒株的F基因都没有碱基的缺失和插入,但有多处点突变,分散存在。(2)分离株的55~61、72、84~89及128~130之间的氨基酸均高度保守,突变的氨基酸位点多集中在101~111之间。(3)ZD-1/02、ZD-2/02、ZD-3/02、BJ、YQ/01、TJ/99同鹅源的NDV株JS01-5-GO、ZJ00-1-GO及JS98-3-GO株在系统发育树上的距离较近,说明当今鸡ND的流行同鹅的ND有着密切的关系。(4)BJ、SF、TJ/99、YQ/01、TS/01、ZD-1/02、ZD-2/02、ZD-3/03等8株为基因Ⅶ型,SJZ/99和BT/03为基因Ⅵ型,表明河北、北京、天津等地区ND的流行以新的基因Ⅶ型的为主,但同时又有旧基因Ⅵ型的存在,说明ND的流行情况比较复杂,给ND的防制工作带来了一定的难度。在以上生物学试验及遗传变异分析的基础上,本(本文此处忽略..)研究对分离鉴定的8株NDV及LaSofa、F_(48)E_8、QH_8/79、SH_7/99等共12株NDV,采用固定病毒,稀释血清的方法,进行交叉血凝抑制试验和鸡胚交叉中和试验。结果表明,LaSota同强毒株之间的相关系数较低,在5.89%~48.41%之间。强毒株之间相关系数除去个别的几个相对较低外,大部份都在25.12%~186.19%之间。将交叉中和试验和遗传变异分析的结果相结合,进行综合分析,结果说明疫苗毒LaSota株同现今流行毒株之间确实存在一定的抗原性差异性。另外可以看出同一基因型之间的相关系数较高,如属于基因Ⅵ型的SJZ/99和BT/03的相关性为114%,属于基因Vn型的毒株之间的相关系数在25.12%~186.19%之间,从一定程度上表明基因型同抗原性存在着一定的相关性,但没有明显的规律。若(此处忽略..)要彻底弄清基因型同抗原性的相关关系,就必须进一步做交叉保护试验来验证。


以上为本篇毕业论文范文鸡新城疫病毒强毒株的分离鉴定及其遗传变异分析的介绍部分。
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