siRNA靶向抑制GHR联合5-FU对人结肠癌细胞SW480肝转移的影响

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siRNA靶向抑制GHR联合5-FU对人结肠癌细胞SW480肝转移的影响

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毕业论文范文题目：siRNA靶向抑制GHR联合5-FU对人结肠癌细胞SW480肝转移的影响，论文范文关键词：siRNA靶向抑制GHR联合5-FU对人结肠癌细胞SW480肝转移的影响
siRNA靶向抑制GHR联合5-FU对人结肠癌细胞SW480肝转移的影响毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：针对人生长激素受体(GHR)在肿瘤转移中的重要信号转导作用,通过构建人GHR干扰质粒、建立人结肠癌细胞SW480BALB/c小鼠肝转移模型,研究GHR在结肠癌肝转移中的作用,观察应用siRNA技术靶向抑制GHR联合5-FU对人结肠癌细胞SW480肝转移的影响,为治疗结肠癌肝转移提供一种新的思路。方法：1、GHR质粒的构建：根据HomoSapiensgrowthhormonereceptor基因序列设计并合成4对miRNAoligo干扰序列,再将4对oligo退火成双链,并分别挑取3个克隆进行测序,验证重组克隆中插入片段序列是否与设计的oligo序列一致。2、人结肠癌细胞SW480BALB/c小鼠肝转移模型的建立：健康8周龄雌性BALB/c小鼠10只,体重20～22g。小鼠麻醉成功后,取左背部斜切口0.5-1.0cm,进腹暴露脾脏,将脾下极提出腹腔,5#针头沿脾脏长径斜行穿刺至脾脏被膜下并在被膜下前行约0.5cm,缓慢注人（此处忽略..）指数生长期的人结肠癌SW480细胞悬液0.1ml(细胞浓度1×107个/ml),脾脏放回原位关腹。继续在Ⅱ级动物实验室常规饲养。术后第30天处死小鼠,组织学检查证实小鼠肝转移建模成功。3、siRNA靶向抑制GHR联合5-FU对人结肠癌细胞肝转移的影响：36只BALB/c小鼠随机分成生理盐水组、质粒组、生长激素组、5-氟尿嘧啶组、质粒组+5-氟尿嘧啶、质粒+生长激素+5-氟尿嘧啶组6组(n=6),脾脏被膜下注射人结肠癌SW480细胞悬液(同第2部分方法)。术后第一天开始给药,共10次：①生理盐水组(NS)：腹腔注射,NS10μl/次/3d/只；②生长激素组(GH)：皮下注射,rhGH2IU/kg/次/3d/只；③5-FU组(FU)：腹腔注射,5-FU20mg/次/kg/3d/只；④质粒组(G4)：皮下注射,G410μg/次/3d/只；⑤质粒+5-FU组(G4+FU)：给药方法和剂量同③、④；⑥质粒+GH+5-FU组(G4+GH+FU):给药方法和剂量同②、③、④。观察小鼠饮水、摄食、精神及（此处忽略..）活动状态,称重/次/5天。接种后第30天处死小鼠,取肝、脾标本,以10%甲醛固定,石蜡包埋切片(切片厚度4gm),HE染色,行病理组织学观察,计数各组肿瘤肝转移率及转移数。结果：1、体重变化：接种人结肠癌细胞的36只SW480BALB/c小鼠全部成活。术前各组小鼠间体重无差异；术后第1天,各组小鼠少动、精神萎靡,饮水、摄食量减少,体重较术前减轻(P0.05)。术后第5天,GH组小鼠体重恢复,G4组明显低于NS组(P0.05)；术后第30天,G4+GH+FU组小鼠体重与术前无明显差异,而NS组、G4组、5-FU组、G4+FU组仍低于术前(P0.05)；GH组小鼠体重第5～30天,体重均高于NS组、G4组和G4+FU组(P0.05),术后第10～30天G4+GH+FU组小鼠体重较NS组、5-FU组、G4组和G4+FU组明显增加(P0.05),术后第20天FU组和G4+FU组小鼠体重明显低于NS组(P0.05)。2、形态学改变：各组表现为不同程度的肝脾体积变小,质脆硬,表面散在分布大小不一的肿瘤。肝表面转移癌（本文此处忽略..）结节主要位于肝叶边缘和肝叶脏面,以右叶多见,部分小鼠呈多发针尖大小、散在分布的灰白色微小转移灶。NS组和GH组分别有1例瘤体表面破溃。NS组、GH组、FU组、G4组、G4+FU组和G4+GH+FU组分别有5、4、3、3、2、1只小鼠出现少量血性腹水。3.3、组织学改变：①36只BALB/c小鼠肝脏、脾脏上均有肿瘤形成,脾脏成瘤率及肝转移率均为100%；②脾脏接种瘤癌细胞聚积成团,正常的脾脏组织结构大部分被破坏,细胞体积缩小,癌细胞分化差,异型性明显,胞浆和核固缩、核碎裂、溶解,核分裂相增多,符合结肠低分化腺癌的结构特征。NS组和GH组肿瘤病灶明显多于G4组、FU组、G4+FU组和G4+GH+FU组(P0.05)；③肝脏转移瘤细胞聚积成团,正常的肝小叶结构大部分被破坏,细胞体积缩小,癌细胞分化差,异型性明显,胞浆和核固缩、核碎裂、溶解,核分裂相增多,与脾脏上肿瘤结节的形态结构相似,符合结肠低分化腺癌的结构特征。NS组（文章此处忽略..）和GH组肿瘤转移病灶明显多于G4组、FU组、G4+FU组和G4+GH+FU组(P0.05)。结论：1、GHR在结肠癌肝转移中可能扮演着重要角色；2、通过siRNA靶向沉默GHR可降低结肠癌细胞肝转移率；3、应用5-FU和siRNA靶向沉默GHR的同时,使用GH不会增加结肠癌细胞肝转移率,且可改善小鼠术后一般状况；4、siRNA靶向沉默GHR联合5-FU没有协同降低结肠癌细胞肝转移率。

以上为本篇毕业论文范文siRNA靶向抑制GHR联合5-FU对人结肠癌细胞SW480肝转移的影响的介绍部分。

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