PKCδ抑制剂对脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞损伤的干预作用

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PKCδ抑制剂对脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞损伤的干预作用

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毕业论文范文题目：PKCδ抑制剂对脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞损伤的干预作用，论文范文关键词：PKCδ抑制剂对脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞损伤的干预作用
PKCδ抑制剂对脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞损伤的干预作用毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的：研究蛋白激酶C的亚型PKCδ在大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC)中的表达，通过观察脂多糖(LPS)诱导的RPMVEC损伤时PKCδ表达的变化，以及PKCδ抑制剂楸毒素(Rottlerin)对单层通透性增高的干预作用。探讨PKC特异性亚型在LPS诱导的RPMVEC损伤中的作用。方法：在体外分离、培养的RPMVEC的基础上进行PKCδ的Western印迹和免疫组化检（本文此处忽略..）测，以及LPS作用后PKCδ表达的变化。用针头式滤器检测LPS及LPS+Rottlerin干预后RPMVEC单层滤过系数(Kf)的变化。结果1体外成功分离培养RPMVEC，经形态学、Ⅷ因子相关抗原及FITC-BSI结合实验证实所获得为RPMVEC；在细胞传代时采用含有EDTA的胰蛋白酶，缩短了消化传代的时间，减少了传代过程中胰蛋白酶对细胞的损伤；成功进行了细胞的冷（文章此处忽略..）冻和复苏，为今后的实验打下基础。2首先通过采用免疫组化的方法明确了PKCδ在RPMVEC中有广泛的表达，其表达部位位于胞浆。Western印迹检测PKCδ出现一条蛋白印迹条带，分子质量与蛋白质分子质量Mark相比，约为77KD，进一步证实了PKCδ在RPMVEC中存在。采用10μg／mlLPS作用RPMVEC60min后与正常对照组比较，PKCδ表达明显增高。310μg／mlL（此处忽略..）PS、5μM／LRottlerin分别作用15、30、60、90、120min，LPS组RPMVEC单层的Kf值较对照组显著增高，Rottlerin组较对照组无明显差异。Rottlerin+LPS组各时相点Kf值显著低于LPS组。结论：1成功进行原代培养RPMVEC，形态学、Ⅷ因子相关抗原及FITC-BSI结合实验证实所获得为RPMVEC、并在对传代方法改进后成功对细胞进行冷冻和复苏（本文此处忽略..）。2采用免疫组化的方法证实了PKCδ在RPMVEC中有表达，其表达部位在细胞浆；LPS可导致RPMVEC表达PKCδ增高。3采用PKCδ特异性抑制剂Rottlerin可部分抑制LPS导致的RPMVEC单层通透性增高，LPS导致RPMVEC单层通透性增高的机制可能为激活了细胞内的PKC途径。

以上为本篇毕业论文范文PKCδ抑制剂对脂多糖诱导大鼠肺微血管内皮细胞损伤的干预作用的介绍部分。

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