印度南瓜（C.maxima.L）品种指纹图谱构建及其在种子纯度检测中的

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印度南瓜（C.maxima.L）品种指纹图谱构建及其在种子纯度检测中的

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印度南瓜（C.maxima.L）品种指纹图谱构建及其在种子纯度检测中的毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：随着生物技术的快速发展,分子标记技术越来越多的应用于生物学多种领域中,本文应用相关序列扩增多态性(Sequence-relatedAmplifiedPolymorphism,SRAP)标记和限制性位点扩增多态性(RestrictionSiteAmplificationPolymorphism,RSAP)标记对印度南瓜品种锦栗南瓜杂交种子纯度进行了鉴定,探索了SRAP技术的优化条件,创造性探索出南瓜种子发芽根尖细（此处忽略..）胞DNA快速提取方法。1)比较三种DNA提取方法,对印度南瓜根尖细胞DNACTAB法快速提取方法进行了改良探索。DNA提取材料可以结合杂交种子发芽实验进行,先进行发芽实验,然后取根尖细胞提取DNA进行纯度检测。实验材料准备时间只要3d,0.05g南瓜种子发芽根尖材料在55℃裂解时加10URNaseA降解RNA55min,减少了提取和纯化步骤,实验免除液氮磨样,提取DNA质量达到试剂盒提取南瓜真叶的DNA质量水平,DNA产率高,（此处忽略..）研究表明该方法对于建立印度南瓜品种分子标记快速检测系统具有很大优势和创新意义,可以大大节省时间和管理成本。2)采用L_(16)(4~5)正交表设计实验,对dNTP、模板DNA、引物、Taq聚合酶和MgCl2等5种影响因素设置4个水平16个组合,2次重复实验。试验优化的南瓜SRAP反应体系为：10x反应buffer(100mmol/LTris-HCl,100mmol/LKCl,80mmol/L(NH4)2SO4,pH9·0)25μL反应液中:10×buffer2.5μL,0.2mmol/L（文章此处忽略..）dNTPs,引物0.2μmol/L,1.5mmol/LMgCl2,DNA模板6ng/μL,Taq酶1.5U。3)优化的SRAP反应程序为：94℃5min;94℃40s35℃40s72℃90s5个循环：94℃40s50℃40s72℃90s32次循环；最后延伸5min。经验证,该体系和程序同样适合RSAP反应。4)优化了印度南瓜RAPD反应程序：94℃预变性5min,94℃变性45s,36℃退火45s,72℃延伸90s,40个循环,最后72℃下延伸7min。5)建立了锦栗南瓜指纹图谱,SRAP标记和RSAP标记具有丰富的多态性。利用E（此处忽略..）1M5和R1R7可以很好的区分出红栗二号、红栗、锦栗二号、锦栗南瓜。利用标记R1R7成功进行了锦栗杂交种子纯度检测,检测结果与田间检测结果吻合率达到90%。

以上为本篇毕业论文范文印度南瓜（C.maxima.L）品种指纹图谱构建及其在种子纯度检测中的的介绍部分。

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