人巨细胞病毒感染Balb/c小鼠椎间盘组织及其变性的相关性研究

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人巨细胞病毒感染Balb/c小鼠椎间盘组织及其变性的相关性研究

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毕业论文范文题目：人巨细胞病毒感染Balb/c小鼠椎间盘组织及其变性的相关性研究，论文范文关键词：人巨细胞病毒感染Balb/c小鼠椎间盘组织及其变性的相关性研究
人巨细胞病毒感染Balb/c小鼠椎间盘组织及其变性的相关性研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：目的在建立HCMV感染Balb/c小鼠模型的基础上,依据活体Balb/c小鼠模型导入组织学、基因表达、免疫学的研究,检测模型小鼠椎间盘组织的感染状态,同时观察椎间盘组织的病理改变,初步探讨HCMV感染Balb/c小鼠椎间盘组织及其变性的相关性,旨在为临床腰痛的病因学、诊断与防治学研究提供了实验依据。方法将安医大微生物学教研室纯化后的HCMVAD_(169)株分别取2×10~6PFU/ml、2×10~5PFU/ml、2×10~4PFU/ml、2×10~3PFU/ml和2×10~2PFU/ml五个病毒感染量腹腔注射6-8周SPF级Balb/c小鼠1.0ml/只,雌雄各6只。将浓度为2×10~6PFU/ml的病毒56℃30min灭活后1.0ml/只腹腔注射雌雄小鼠各6只作为灭活对照组（略..）。同株同代的HF细胞悬液1.0ml/只腹腔注射雌雄小鼠各6只作为HF细胞对照组,各组小鼠均在屏蔽系统中饲养。分别在病毒接种1、2、3个月后取组织进行实验。用不同的方法检测如下指标:(1)通过倒置显微镜逐日观察HCMV致鼠椎间盘组织细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE),并观察其病变特征;(2)通过PCR和RT-PCR方法检测鼠椎间盘组织细胞中与HCMV复制增殖的重要基因UL83DNA和UL54mRNA;(3)小鼠免疫状态检测:用间接ELISA法检测小鼠血清中的HCMVIgG、IgM抗体水平;(4)椎间盘组织退变相关病理学检测:HE染色检测小鼠椎间盘组织构筑和病理改变。结果(1)经连续4～6w观察,发现2×10~6PFU/ml和2×10~5PFU/ml感（文章此处忽略..）染组的雌性小鼠椎间盘组织匀浆接种HF细胞出现病毒致细胞病变效应,可见椎间盘细胞肿胀、变圆,胞内颗粒增多,折光性增强、脱落等病变;(2)PCR检测刮取的病变细胞,在766bp处有HCMVUL83基因特异性的扩增条带,其他各组在盲传3代后均未发现细胞病变效应,PCR也未检测到特异性条带;RT-PCR检测椎间盘组织中HCMVUL54基因转录产物:2×10~6PFU/ml和2×10~5PFU/ml感染组的雌性小鼠在142bp处检测到特异性条带,证实HCMV在椎间盘组织中为活动性感染;(3)小鼠免疫状态检测:间接ELISA检测小鼠血清中的IgG、IgM抗体水平,感染组和病毒灭活组小鼠IgG抗体均为阳性,HF细胞对照组为阴性,OD值分别为:0.7±0.06、0.5±0.04、0.（此处忽略..）12±0.02,三组之间的差异有统计学意义(P＜0.05)。小鼠IgM抗体仅活动感染组为阳性,病毒灭活组和HF细胞对照组均为阴性,其OD值分别为:0.53±0.15、0.13±0.02、0.08±0.01,活动感染组与病毒灭活组、HF细胞对照组之间的差异有统计学意义(P＜0.05)。(4)小鼠椎间盘组织HE染色病理观察结果:病毒活动性感染组小鼠椎间盘组织出现明显的病理变化,镜下可见纤维环板层结构紊乱,部分髓核组织皱缩,髓核的脊索细胞和软骨细胞排列不均匀,细胞数目减少,纤维环和髓核之间的过渡区变窄,关节软骨钙化层增厚,大量黏液及泡沫细胞,软骨下血管明显减少,局部灶性淋巴细胞浸润等慢性炎症反应。而灭活组和对照组小鼠椎间盘组织未出现明显的病理变化。结论HCMVAD_(169)株能够感（文章此处忽略..）染Balb/c小鼠椎间盘,感染与否跟病毒的感染量有关;HCMV活动性感染与椎间盘变性有相关性,HCMV注射后似乎能逐渐诱导椎间盘变性,出现病理学改变,可能是椎间盘退变的一个重要危险因素之一;该模型对椎间盘变性的分子水平研究有显著的优势,为临床腰痛的病因学、诊断与防治学研究提供了实验依据。

以上为本篇毕业论文范文人巨细胞病毒感染Balb/c小鼠椎间盘组织及其变性的相关性研究的介绍部分。

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