C肽对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡影响的研究

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C肽对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡影响的研究

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毕业论文范文题目：C肽对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡影响的研究，论文范文关键词：C肽对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡影响的研究
C肽对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡影响的研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：背景和目的糖尿病(diabetesmellitus，DM)作为一种代谢性疾病，其各种急、慢性并发症是使患者致死、致残的主要原因。慢性并发症包括大中血管病变和微血管病变。糖尿病肾病(diabeticnephropathy，DN)是糖尿病微血管病变之一，是1型糖尿病的主要死因，亦是2型糖尿病的重要死因。DN的发病机制尚未明确，其早期表现为肾小球系膜细胞增生，小管间质扩张，肾小球系膜区和小管间质细胞外基质积聚，伴随出现蛋白尿及肾小球滤过率降低，最终导致肾小球硬化及肾小管间质纤维化。近来的研究表明，高糖状态对肾小球细胞是一种亚坏死性损伤剂，导致凋亡发生率增加，提示细胞凋亡可能参与了糖尿病及其并发症的发生、发展。目前DN尚无特异性治疗手段。因此，探索其发病机制，寻找新的有效的防治措施已成为当前重要的研究课题。系膜细胞(mesangialcells，MCs)是肾小球内产生细胞外基质(extracellul（文章此处忽略..）armatrix，ECM)的主要固有细胞，在DN发病过程中不仅是被动受害者，而且也是直接参与者，通过其自身代谢和功能改变直接影响DN进程。C肽是胰岛素A链和B链之间的连接肽。在研究胰岛素的结构和生物功能的关系中，过去人们一直认为C肽无生物活性，仅在胰岛素二硫键正确配对时起作用。但近年很多研究肯定C肽具有多种生物学作用。动物实验和临床研究显示，1型DM患者联合补充胰岛素和C肽后，可以减轻和延缓DM微血管并发症发生和发展，这些疗效是单独应用胰岛素所不能完全达到的．提示C肽在糖尿病防治中可能具有深远的意义。本实验应用体外高糖培养的大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1，观察C肽和／或胰岛素对细胞增殖、细胞凋亡及凋亡相关基因Bc1-2和Bax蛋白表达的影响，并进行相关分析。进一步证实C肽的生物活性及其对糖尿病的微血管保护作用，为临床C肽与胰岛素联合应用治疗糖尿病提供更多的理论支持。材料与方法本实验在（此处忽略..）大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1体外培养的基础上，进行实验分组。(1)葡萄糖组，分为正常对照组(NG5.5mmol／L)，高糖组(HG33.3mmol／L)，高渗甘露醇组(mannitol30mmol／L)；(2)C肽组(HG+C-p)；(3)胰岛素组(HG+Ins)；(4)胰岛素+C肽组(HG+Ins+C-p)。每组设平行孔6孔，培养24h、48h、72h。实验结束时应用四甲基偶氮唑盐光吸收法(MTT)、原位末端标记(TUNEL)法、流式细胞术(FCM)、免疫细胞化学技术(SP法)检测不同浓度的葡萄糖，C肽和胰岛素对细胞增殖、细胞凋亡及Bc1-2和Bax蛋白表达的影响。结果(1)高糖组在24h、48h、72h时段的吸光度值均较正常对照组增高，尤以48h增高最明显，在72h时呈下降趋势(尸值均＜0.05)；高渗甘露醇组与正常对照组相比差异无显著性(P值＞0.01)；C肽组与高糖组比较，当C肽浓度为0.5nmol／L时，吸光度值无显著差异(P值＞0.05)；当C肽浓度等于或大于10nmol／L时，吸光度值显著下降(P值均＜0.05)，系膜细胞的增（文章此处忽略..）殖明显受到抑制。(2)与正常对照组比较，其它实验组阳性细胞显著增多，差别有统计学意义(P值均＜0.05)；与高糖组比较，干预组均可使高糖诱导的TUNEL阳性细胞数减少；且C肽和胰岛素联合组较单独胰岛素和单独C肽干预阳性细胞数减少更明显，差别有统计学意义(P值均＜0.05)。(3)流式细胞术细胞周期结果显示，高糖组较其它实验组细胞增殖指数显著增高(P值均＜0.05)，而C肽和胰岛素联合组较高糖组明显降低，差别有统计学意义(P值＜0.05)。与正常对照组比较，高糖组凋亡率显著增高(P值＜0.05)；C肽和胰岛素联合组与高糖组比较，凋亡率降低，有显著差异(P值＜0.05)。(4)bc1-2与bax基因在各组均有不同程度表达，与正常对照组比较，高糖组Bc1-2蛋白表达减弱，Bax蛋白表达增强(P值均＜0.05)；与高糖组比较，C肽和胰岛素联合组Bc1-2蛋白表达增强，Bax蛋白表达减弱(P值均＜0.05)。结论(1)高糖环境下体外培养的细胞系HBZY-1存在增殖，C肽和胰岛素能够抑制高糖诱导的大鼠肾（文章此处忽略..）小球系膜细胞的异常增殖；(2)高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞凋亡增加，bax基因表达增加、bc1-2基因表达下降、bax／bc1-2比例上调，提示细胞凋亡及bc1-2、bax可能参与了糖尿病肾病的发病；(3)C肽和胰岛素合用使Bax蛋白表达下降、Bc1-2蛋白表达增加，C肽通过影响bc1-2／baX基因表达减少大鼠肾小球系膜细胞凋亡。提示C肽具有抗凋亡作用，C肽和胰岛素合用对肾脏可能有保护作用。其作用机制部分可能是通过减少细胞凋亡及影响凋亡相关基因实现的。

以上为本篇毕业论文范文C肽对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡影响的研究的介绍部分。

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