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核酸扩增技术在血液筛查中的应用研究

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毕业论文范文题目:核酸扩增技术在血液筛查中的应用研究,论文范文关键词:核酸扩增技术在血液筛查中的应用研究
核酸扩增技术在血液筛查中的应用研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:背景:输血传播性感染是重大的医学问题,为输血治疗的主要安全隐患之一。除乙型病毒性肝炎(HepatitisBvirus,HBV)、丙型病毒性肝炎(HepatitisCvirus,HCV)、人类免疫缺陷病毒(Humanimmunodeficiencyvirus,HIV)外,有新型病毒与寄生虫感染被确定与输血相关,也不断有新的检测方法被应用于血液筛查。目的:比较酶联免疫吸附实验(Enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)和核酸扩增技术(Nucleicacidamplificationtesting,NAT)对成都市无偿献血者HBV、HC(此处忽略..)V和HIV的筛查效果,对核酸扩增技术在血液筛查应用情况进行分析,评价其应用价值,并为今后无偿献筛查中开展常规NAT的推广应用提供参考依据。方法:以成都市血液中心2010年9月20日至2011年3月9日期间的68344名无偿献血者为研究对象,肘静脉取血经乙二胺四乙酸抗凝后分离血浆,利用ELISA对血样HBV、HCV、HIV和梅毒螺旋体感染情况分别用国产试剂和进口试剂进行初检和复检,并检测谷丙转氨酶(Alaninetransaminase,ALT)水平。对于ELISA两次检验为阴性并且ALT≤40U/L的血样,利用COBASs201系统(Rochediagnostics,COBAS(?)AmpliPre(文章此处忽略..)p(?)/TaqMan(?))的HamiltonSTAR混样仪进行6人份血样混合、COBASAmpliprep核酸纯化加样仪自动提取DNA或RNA、COBASTaqMan荧光PCR仪进行PCR扩增、PDMServer服务器进行数据分析,完成对HBVDNA、HCVRNA、HIVRNA的核酸检测。若6人份混样的微汇集池NAT(Minipool-NAT)呈反应性,分拆行单样本NAT(Individual-NAT,ID-NAT)检测反应性样本,以COBASTaqScreenMPX检测试剂盒确认检测。结果:ELISA检测结果显示,68344名无偿献血者的血样中有94.84%(64820/68344)的血浆病毒反应呈阴性(此处忽略..),其余5.16%(3524/68344)的血样经国产或/和进口试剂检验呈阳性。3524份ELISA检测阳性的血样中,22.36%(788/3524)的血样乙肝表面抗原(HBsAg)检测为阳性,21.03%(741/3524)抗-HCV检测阳性,5.62%(198/3524)抗-HIV检测阳性,22.59%(796/3524)抗-TP检测阳性,28.41%(1001/3524)的血样ALT≥40U/L。对ELISA两次检测反应呈阴性的64820份标本中容量为200,300ml的22139份标本进行NAT检测,6人份混合样本NAT反应呈阳性为31份,经拆分单样本NAT检测后阳性数为19份,ELISA漏检率为0.086%(19/22139)。19份NAT检测反应呈阳性的血样经卫生部临检中心鉴定显示,HBVDNA阳性率为84.21%(16/19),HCV阳性率为15.79%(3/19),未检测出HIV阳性血样。结论:核酸扩增技术灵敏度高,可减少传统(此处忽略..)酶联免疫吸附实验筛查血液病毒的漏检率,可用于无偿献血的血液病毒筛选ELISA检测阴性血样的补充检测。


以上为本篇毕业论文范文核酸扩增技术在血液筛查中的应用研究的介绍部分。
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