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重阳木丛枝病植原体的分子鉴定及与其它几种植原体的相关性研究

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毕业论文范文题目:重阳木丛枝病植原体的分子鉴定及与其它几种植原体的相关性研究,论文范文关键词:重阳木丛枝病植原体的分子鉴定及与其它几种植原体的相关性研究
重阳木丛枝病植原体的分子鉴定及与其它几种植原体的相关性研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:重阳木是我国南方重要的阔叶树种之一,丛枝病在我国重阳木栽种区发生普遍,表现为植株叶片变小、黄化或变红、枝条节间缩短、侧芽过度生长,导致丛枝、衰退、梢枯,严重时整株枯死。已有研究表明重阳木丛枝病(BiWB)是由植原体(原称为类菌原体)引起的,目前此病害仅在我国有报道。由于病原分子生物学研究信息缺乏而未能被鉴定和系统归类。本研究用分子生物学方法对我国不同地区BiWB植原体进行鉴定,并运用新的分类方法对其进行了分类。扩增、克隆并测定了该植原体的浙江、安徽和江西分离物16SrRNA基因、23SrRNA基因、延伸因子(tuf)基因、核糖体蛋白(rp)基因及16S-23SrDNA间(略..)区(SR)等相对保守序列,将得到的序列与GenBank上已公布的植原体相应基因的序列进行比较,最终确定了三个地区的BiWB由单一病原侵染所致,未发现与其它组植原体混合感染的现象。结果显示,BiWB植原体与榆树黄化组(Elmyellowsgroup,16SrⅤ)成员的16SrDNA序列相似性都在98%以上,而与其它组成员相似性低于97.5%;与枣疯病(JWB)植原体的SR序列相似性在99%以上;与已测定的丝瓜丛枝病植原体(16SrⅧ)的23SrDNA序列相似性最高,为94%;与河南JWB植原体tuf基因的序列相似性达99.9%;rp基因与16SrⅤ组其中另外三个成员的相似性都在95%以上。从而确定三个地(此处忽略..)区BiWB植原体归属于榆树黄化组,与我国发生JWB、樱桃致死性黄化和黄槐丛枝病的植原体为同一组的成员,未检测到过去根据PCR-RFLP分析结果鉴定出的三叶草簇生组(Cloverproliferationgroup,16SrⅥ)植原体的存在。针对重阳木植株中可能存在的对PCR有影响的物质,及此植原体基因组与泡桐丛枝病(PaWB)植原体等16SrⅠ成员差异明显的特点,本研究对DNA提取方法和PCR的条件进行了一系列的摸索和改进,建立了优化的实验条件,包括在DNA提取过程中去掉叶肉、选用组培病苗等,进行PCR时对模板DNA稀释、选择最佳退火温度等。并且发现不同(文章此处忽略..)组植原体间、不同基因间的G+C含量与比率有明显的差异,这种差异可能会影响PCR扩增的条件。进一步用BiWB植原体与我国发生PaWB、JWB、长春花绿变病(PV)、苦楝丛枝病(CBWB)的重要植原体进行了部分DNA比较,包括23SrRNA基因的序列分析与RFLP、染色质外DNA的扩增与产物的RFLP分析、Southernbloting以及几个地区PaWB植原体的变异分析。结果验证了BiWB植原体作为16SrⅤ组成员的地位;进一步肯定了PV植原体和CBWB植原体被划为16SrⅠ组成员是恰当的。所鉴定的与叶酸合成相关的基因folP在PaWB、BiWB、PV和CBW(本文此处忽略..)B植原体中编码FolP蛋白,未发现三叶草簇生植原体等的叶酸合成功能丧失的假基因ΨfolP,四者的序列相似性都在98%以上。本研究对BiWB植原体进行了分子鉴定,初步研究了它与其它植原体的系统进化关系和分子差异;建立了BiWB植原体快速准确的检测、鉴定与鉴别的技术体系;为这些植原体的科学分类和命名、病原基因组学和功能基因组学研究、亚组及变异分析、病原检测、病害检疫、流行学研究及病害的治理等都奠定了良好基础。


以上为本篇毕业论文范文重阳木丛枝病植原体的分子鉴定及与其它几种植原体的相关性研究的介绍部分。
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