桑椹红色素的提取纯化及其抗氧化活性和稳定性研究

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桑椹红色素的提取纯化及其抗氧化活性和稳定性研究

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毕业论文范文题目：桑椹红色素的提取纯化及其抗氧化活性和稳定性研究，论文范文关键词：桑椹红色素的提取纯化及其抗氧化活性和稳定性研究
桑椹红色素的提取纯化及其抗氧化活性和稳定性研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：桑椹(Mulberry)俗称桑枣、桑果、桑实、桑子,为桑科桑属植物桑(MorusalbaL.)的成熟聚花果,桑椹中含有大量的花色苷类色素,是一种很好的花青素类色素资源。桑椹花青素水溶性强,在碱性条件下呈蓝色,在酸性溶液中呈深紫红色,具有补血、润脑、利肝、利尿、抗氧化、抗突变、抗肿瘤等多种药理活性,因此桑椹红色素作为天然色素,越来越受到广大学者的关注。目前国外对桑椹红色素研究的相关报道较少,国内对桑椹红色素的研究主要集中在提取纯化工艺的研究上,对高纯度桑椹花青素的制备研究尚未见报道,因此本文着重研究桑椹红色素的分离纯化及抗氧化活性,为桑椹红色素的应用提供理论基础。本论文以冷冻桑椹为原料,对桑椹红色素的提取工艺、定性定量分析方法、纯化工艺、抗氧化活性和稳定性进行系统的研究,主要研究内容和结果如下:研究桑椹红色素的最佳提取工艺。采用溶剂提取法提取桑椹中的桑椹红色素,影响桑椹红色素得率的主要因素有温度、时间、液料比和提取液浓度,以最大吸收波长513nm下的吸光度值为考察指标进行单因素实验,考察单个因素对色素得率的影响;在单因素实验的基础上选择浸提温度、浸提时间、浸提液浓度、液（略..）料比为考察因素,以吸光度值为考察指标,进行正交试验,结果表明,桑椹红色素提取的最佳工艺条件为:温度50℃,提取时间90min,液料比15:1,浸提液浓度为40%(80%乙醇:0.1%HCl=1:1),此时桑椹红色素提取物得率为102.6mg/g,验证试验表明此工艺稳定,可用于桑椹红色素的提取。研究桑椹花色苷的分析方法。本文分别采用四种定性方法—颜色反应、纸层析、薄层层析和紫外-可见光谱分析对桑椹红色素的主要成分—桑椹花色苷进行定性分析,通过四种定性方法分析初步判断桑椹红色素的主要成分为矢车菊-3-葡萄糖苷。桑椹红色素的定量分析方法主要有色价法、消光系数法、pH示差法和NaNO_2-Al(NO_3)_3比色法。分别采用四种定量方法对桑椹红色素进行定量分析。结果表明,纯化后色素的色价是纯化前的14.8倍,消光系数法测得桑椹红色素中花青素含量为0.015%,pH示差法测得其含量为0.017%,NaNO_2-Al(NO_3)_3比色法测得花青素含量为0.0076%。pH示差法是前人研究较为成熟的一种方法,相对较为准确、简便,优于其它方法。研究大孔树脂纯化的最佳条件。通过静态吸附和解析实验对四种大孔树脂—NKA、D101、AB-8和D1300进行筛选,分别计算其吸附率和解析率,结果表明（略..）,D101大孔树脂吸附率最高,为72.1%,解析率达68.5%,因此确定D101为本实验的最佳树脂。影响大孔树脂吸附的主要因素有料液浓度,料液pH及上柱速度,影响其解析效果的主要因素有洗脱液浓度、洗脱液体积和洗脱速度,分别进行动态吸附和动态解析的单因素实验,并在单因素实验的基础上进行吸附和解析的正交实验,分别以吸附量和解析率为考察指标对吸附和解析效果进行考察。通过大孔树脂吸附的单因素和正交实验可知最佳吸附条件为:料液浓度1.071Abs(以吸光度表示),料液pH3,上柱速度1mL/min;通过动态解析的单因素和正交实验得出大孔树脂的最佳解析条件为:洗脱液浓度80%(乙醇),洗脱液体积2BV(柱体积),洗脱速度1mL/min,此条件下的解析率为86.1%。用4BV的0.01%HCl洗脱大孔树脂柱,去除桑椹红色素粗提物中的糖类等可溶性杂质;用3BV的乙酸乙酯萃取三次,去除桑椹红色素中的脂溶性多酚类杂质,糖类杂质的去除率为100%,脂溶性多酚类杂质去除率为39.65%,得到桑椹红色素纯化液。对桑椹红色素纯化液进行HPLC-DAD-ESI-MS分析,可知该色素中至少含有14种不同的花青素,分别为天竺葵-3-葡萄糖,天竺葵-3-鼠李糖苷,天竺葵-3-芦丁苷,矢车菊-3-葡萄（本文此处忽略..）糖苷,矢车菊-3-芦丁槐糖苷,芍药花素-3-阿拉伯糖苷,矢车菊-3-芦丁苷,矢车菊-3-接骨木二糖苷,矢车菊-3-木糖芦丁苷,锦葵花素-3-葡萄糖苷,矢车菊-3阿拉伯糖苷,矮牵牛-3-葡萄糖芦丁苷,飞燕草-3,5-阿拉伯二糖苷,矮牵牛-3-葡萄糖苷。采用SephadexLH-20对大孔树脂纯化后的桑椹红色素进行再纯化。配制不同浓度的酸性甲醇溶液(20%、40%、60%、80%)洗脱SephadexLH-20柱,并分部收集,绘制洗脱曲线,得到三个组分:组分1、组分2和组分3;对组分1和组分2进行HPLC分析,组分1以矢车菊-3-葡萄糖苷为主(归一化分析结果表明占组分1色素的85.8%),组分2以矢车菊-3-接骨木二糖苷为主(归一化分析结果表明占组分2色素的为78.5%)。桑椹红色素抗氧化实验表明,桑椹红色素粗提液清除自由基效果不明显;桑椹红色素纯化液对超氧阴离子自由基、羟基自由基和过氧化氢自由基的清除能力较好,当浓度为40μg/mL时,纯化液对DPPH·的清除率已达到93.5%;纯化液对·OH的清除率随着溶液浓度的增加而增加,且桑椹红色素溶液对·OH的清除效果与Vc相当,当桑椹红色素溶液的浓度为600μg/mL时,其对·OH的清除率达到88.21%,Vc和桑椹红色素的IC_(50)值分别为123.25,（此处忽略..）132.25μg/mL;纯化液对O_2~-有一定的清除效果,但清除效果弱于Vc,Vc和桑椹红色素的IC_(50)值分别为304.94μg/mL和514.02μg/mL;桑椹红色素具有一定的油脂抗氧化效果,效果较对照品BHT差。桑椹红色素的稳定性实验表明:影响桑椹红色素稳定性的主要因素是pH,该色素在酸性条件下较稳定,颜色鲜艳,加热会使色素发生降解,稳定性下降;桑椹红色素对氧化剂比较敏感,较低浓度就会使大量色素降解,甚至褪至无色;金属离子Na~+,Mg~(2+)对色素稳定性影响不大,Fe~(3+),Cu~(2+)对桑椹红色素的影响较大,使桑椹红色素变成蓝紫色。

以上为本篇毕业论文范文桑椹红色素的提取纯化及其抗氧化活性和稳定性研究的介绍部分。

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