蚕蛹蛋白的酶法水解及其产物的抗氧化性研究

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蚕蛹蛋白的酶法水解及其产物的抗氧化性研究

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毕业论文范文题目：蚕蛹蛋白的酶法水解及其产物的抗氧化性研究，论文范文关键词：蚕蛹蛋白的酶法水解及其产物的抗氧化性研究
蚕蛹蛋白的酶法水解及其产物的抗氧化性研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：蚕蛹(Silkwormpupa)是家蚕(BombyxmoriL.)生命周期中的一个发育阶段。蚕蛹蛋白与蛹肽含有60%以上的人体必须氨基酸,还富含多种营养素,具有补充机体营养、促进生长发育、抗疲劳、抗衰老、提高人体免疫功能等多种功能。本文以蚕蛹蛋白为原料,主要研究了蚕蛹蛋白酶解产物在抗氧化方面的活性,优化了酶解工艺,分离、纯化、制备出活性物质,并对活性物质进行了分析和鉴定。首先研究了蚕蛹脱脂蛋白的制备,从五种常用有机溶剂中选择了正己烷作为萃取剂,并优化蚕蛹脱脂工艺,得到了高纯度的蚕蛹脱脂蛋白。分别利用protamex复合蛋白酶、Flavourzyme复合风味蛋白酶、G（本文此处忽略..）C710中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶、复合胰蛋白酶等六种蛋白酶对脱脂蚕蛹蛋白进行水解,研究酶解产物的生物活性,结果发现六种蚕蛹蛋白酶解产物的血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性水平均较低,但具有较强的清除1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl(DPPH·)、羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-·)的能力,其中木瓜蛋白酶酶解产物清除自由基的能力最强。研究了pH、温度、加酶量、底物浓度等条件对蚕蛹蛋白水解度(DH)以及酶解液清除DPPH·、·OH和O2-·的能力的影响。酶解液清除DPPH·、O2-·和·OH的能力与其水解度的关系均表现为相似的趋（本文此处忽略..）势。通过响应面分析,分别获得酶解液清除DPPH·、O2-·和·OH活性的最佳酶解工艺条件(样品浓度:30mg/mL):(1)当pH=7.36、T=49.78℃、E/S=2.17%、t=1.90h,酶解液清除DPPH·的能力最强,清除率高达92.38%;(2)当pH=7.48、T=50.23℃、E/S=2.00%、t=1.41h,酶解液清除O2-·的能力最强,清除率为48.56%;(3)当pH=7.58、T=49.95℃、E/S=2.10%、t=2.03h,酶解液清除·OH的能力最强,清除率i=93.97%。采用SephadexG-25凝胶过滤色谱分离纯化蚕蛹蛋白酶解产物(SHOC),得到了P1-P4四个组分,其清除DPPH·的能力为:P4P3P2P1,且P4清除DPPH·的能力为P3的3～4倍。分别收集P4的前半峰(P4F)和后（此处忽略..）半峰(P4L)并测定其清除DPPH·的能力,结果发现其自由基清除率分别比酶解液提高了5.28倍和6.49倍,且P4L清除DPPH·的能力与VC相当,IC50(清除DDPH·50%所需加入清除剂的浓度)达到0.1524mg/mL。利用RP-HPLC对P3、P4F、P4L进行了分析,发现P3组成较为复杂,难以进一步分离纯化;进一步利用LC-MS对P4F,P4L进行组成分析和结构鉴定。发现P4F中的两个主要组分P4F2,P4F3的分子量分别为168和222,其中P4F3为二肽Phe-Gly;P4L中的主要组分P4L1与P4F2的质谱图完全一样,分子量均为168,因此为同种物质。进一步利用反相高压液相色谱C18制备柱制备活性物质P4F2、P4F3,并通过冷冻干燥得到了（本文此处忽略..）这两种物质。测定P4F2、P4F3清除DPPH·的能力,发现P4F2(MW168)和P4F3(Phe-Gly)在1mg/mL的浓度下对DPPH·的清除率分别为49.80%和28.50%,且两者之间没有协同效应。

以上为本篇毕业论文范文蚕蛹蛋白的酶法水解及其产物的抗氧化性研究的介绍部分。

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