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组织工程骨修复山羊大节段负重骨缺损的实验研究

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毕业论文范文题目:组织工程骨修复山羊大节段负重骨缺损的实验研究,论文范文关键词:组织工程骨修复山羊大节段负重骨缺损的实验研究
组织工程骨修复山羊大节段负重骨缺损的实验研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:大节段负重骨缺损是临床上一个常见而又棘手的困难,不仅骨缺损量大,而且常常因为骨膜、骨髓及四周组织的毁损而缺乏成骨的细胞源,易构成骨不连,遗留重大功能妨碍。尤为重要的是,负重骨缺损不同于腔隙性骨缺损,不仅请求外形构造的恢复,更请求功能的重建——即可能满意负重活动所请求的生物力学机能。目前临床上仍以自体骨移植作为骨缺损修复的金标准,但取自体骨必定会造成供骨区的病残,取骨量有限。为了避免自体骨移植的种种缺点,人们对骨调换材料进行了不懈的摸索,开发出人工陶瓷、生物多聚物等材料,但因为缺乏生物活性,对大节段骨缺损的修复后果还不太幻想。骨组织工程学使有成骨才能的种子细胞跟存在骨传导才能的支架材料相结合,明显促进骨的再生跟重塑,为大段负重骨缺损的修复提(略..)供了新的思路跟方法。目前,骨组织工程研究集中在种子细胞、支架材料跟二者的彼此作用等方面,并在骨缺损的修复方面获得了明显进展。然而这一技巧用于修复大节段负重骨缺损尚缺乏足够的实验根据,在种子细胞的获取以及体外构建组织工程骨技巧方面仍有争议,更须要开发、筛选出既能满意组织工程骨须要又经济实用的支架材料。为此,咱们设计更加存在临床参考意思的大动物实验模型,研究自体骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)复合同种异体脱钙骨基质(deminerilizedbonematrix,DBM)构建组织工程骨修复大节段负重骨缺损的可行性,为组织工程骨用于临床提供实验根据。首先,通过骨髓穿刺获取MSCs,并在体外扩增、向成骨细胞引诱,获取(此处忽略..)足量有成骨潜能的种子细胞。成果显示:1、接种后4到6天,体外培养的MSCs就可察看到特异的成纤维样集落构成单位,这是干细胞的特点之一。2、以3×105/cm2细胞密度接种的原代细胞9至12天长满单层,以1×104cells/cm2接种的传代细胞4至7天长满单层;3、MSCs表白CD105而不表白CD45.4、MSCs成骨引诱10-12天后构成钙化结节,表白碱性磷酸酶、I型胶原跟骨钙素,与成骨细胞的特点相符;5、流式细胞仪检查未发明培养细胞中有异样倍数染色体。其次,制备山羊DBM,并研究其与MSCs的彼此作用。成果显示:1、DBM成破体网状构造,存在高孔隙率跟孔隙连通率;2、MSCs能在DBM的名义跟更深的孔壁上粘附WP=9伸展跟增植;3、对个别的接种方法,当接种细胞密度超过2×106/ml时,上架细胞数即不再增加,(此处忽略..)细胞在支架上的粘附率低于75%;3、双向接种法可使细胞上架率达到80~95%,支架上的粘附细胞数随接种细胞的密度增高而增加。再次,细胞支架复合体跟DBM被分辨植入羊背部肌袋内,研究其异位成骨才能。前者组织学检查察看到异位成骨,且以软骨内成骨为主、无明显炎症反应,而单纯支架材料无异位成骨;二者X线片上均未见明显的成骨影像。最后,利用山羊构建负重骨大节段缺损的动物模型,研究组织工程骨修复骨缺损的成骨跟重塑过程。成果显示:1、术后4周实验组的缺损区可察看到软骨内成骨,12周骨缺损被新骨连接,24周新生骨组织重塑良好、已濒临畸形骨干;2、植入体内2周后,支架材料内即可察看到血管构成,12周构成丰富的血管网;3、植入4周后DBM开端接收,12周后多少乎完全接收;5、随修复时光延长,修复组织的力学(文章此处忽略..)机能逐步加强,24周达到畸形的85%。综上所述,咱们可能得出论断:1、MSCs的增殖才能强,并可定向引诱向成骨细胞分化,适配合为骨组织工程的种子细胞;2、DBM存在良好的细胞跟组织相容性,其生物降解性与体内的成骨过程相匹配,是组织工程骨较幻想的支架材料;3、双向接种法可能明显进步种子细胞的上架率,有利于组织工程骨的体外构建;4、MSCs-DBM在体内两周后即有丰富的毛细血管构成,可能为成骨提供良好的养分;5、DBM荷载MSCs构建的组织工程骨能明显促进大段骨缺损的愈合,并且可能更快地恢复其力学机能。


以上为本篇毕业论文范文组织工程骨修复山羊大节段负重骨缺损的实验研究的介绍部分。
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