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猪瘟血清抗体检测试剂盒的研制与抗猪瘟病毒基因工程疫苗的研究
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毕业论文范文题目:
猪瘟血清抗体检测试剂盒的研制与抗猪瘟病毒基因工程疫苗的研究
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猪瘟血清抗体检测试剂盒的研制与抗猪瘟病毒基因工程疫苗的研究
猪瘟血清抗体检测试剂盒的研制与抗猪瘟病毒基因工程疫苗的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】
:利用反转录PCR(RT-PCR)技术扩增出猪瘟病毒石门株(CSFVShimenstrain)囊膜糖蛋白E2全基因,再以E2基因为模板扩增其中适于在E.coli中表达且抗原性较好的基因片段(E2蛋白A/D抗原区基因序列),将扩增的两片段依次插入原核表达载体pET-32a(+)中(文章此处忽略..),构建成重组质粒pET-E2和pET-2E2,将两质粒转化受体菌BL21(DE3),对转化重组菌用IPTG进行诱导表达并对诱导表达条件进行了优化,使目的蛋白得到高效表达。应用His-bind树脂层析柱纯化重组2E2蛋白,纯化产物经SDS-PAGE电泳鉴定其纯化效果,并用(此处忽略..)Western-blot检验其特异性。在此基础上,利用重组2E2蛋白作包被抗原,优化反应条件后,建立了检测抗猪瘟病毒血清抗体的重组2E2蛋白—ELISA方法,应用该方法和间接血凝检测试剂盒对收集的120份血清进行检测,结果显示,间接ELISA方法与间接血凝检测方法(文章此处忽略..)相比具有更好的表现力。本研究以猪IgG基因为模板,设计了一对引物,并应用PCR方法扩增出其中重链恒定区部分基因序列。将其克隆入pET-2E2中,构建成pET-2E2-scIgG重组质粒并对其进行诱导表达。取经纯化过的E2,2E2和2E2-scIgG重组蛋白分别免疫小白(文章此处忽略..)鼠,结果表明,三种蛋白均可刺激机体产生体液免疫应答和细胞免疫应答,2E2-scIgG蛋白的免疫效果明显优于另两种蛋白,并且在所选的抗原区域可能存在一个或多个T细胞表位。
以上为本篇毕业论文范文
猪瘟血清抗体检测试剂盒的研制与抗猪瘟病毒基因工程疫苗的研究
的介绍部分。
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