番茄高频再生系统的建立及农杆菌介导IPT和etr1双基因转化研究

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番茄高频再生系统的建立及农杆菌介导IPT和etr1双基因转化研究

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毕业论文范文题目：番茄高频再生系统的建立及农杆菌介导IPT和etr1双基因转化研究，论文范文关键词：番茄高频再生系统的建立及农杆菌介导IPT和etr1双基因转化研究
番茄高频再生系统的建立及农杆菌介导IPT和etr1双基因转化研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：本研究以樱桃番茄(江苏省农科院TM—Cherry—94—引—1)为试材，建立了体外繁殖无性系。比较了不同激素、不同激素浓度配比、蔗糖浓度和一些常用附加物(谷氨酰胺，脯氨酸、酵母浸出物、色氨酸、硝酸银)对番茄子叶、下胚轴愈伤组织形成和不定芽分化的影响。并对影响外植体转化的因素(感染时间、共培养时间、农杆菌浓度、筛选方式等)进行了探讨。构建了双元表达载体dCaMV35Setrl-Ghipt-pBBBast，etrl处于双CaMV35S启动子控制之下，表达增强；IPT基因处于生长素诱导型启动（略..）子GH控制之下。利用农杆菌EHA105(d35CaMVSetrl—GHipt—pBBBast)介导转化，获得了番茄转乙烯受体突变体(etrl)和异戊烯基转移酶(IPT)双基因的再生植株，转化植株在除草剂草丁瞵(PPT)3mg／L的培养基中生长良好。PCR检测证明目的基因已经整合到试材樱桃番茄基因组中，PT-PCR检测证明目的基因在转录水平有一定表达。PAT酶活性检测发现转基因品种的酶活性高于对照。本研究主要进展如下：1番茄种子在40℃水浴中预处理30min，有利于种子的发芽。处理过的种子发芽率高且（略..）出苗一致。2通过正交实验比较不同BA／1AA浓度组合对子叶愈伤组织形成率和不定芽诱导率，发现诱导子叶外植体愈伤组织形成和不定芽再生的最佳激素浓度组合为BA1.0mg／L，IAA0.2mg／L。2，4D显著抑制不定芽的再生。3蔗糖浓度对子叶愈伤组织的形成和不定芽的分化有很大的影响。最适宜的蔗糖浓度为3％。4再生培养基中添加不同的附加物对番茄子叶愈伤组织形成和不定芽诱导影响与附加物的种类和浓度有关。添加50mg／L谷氨酰胺能够促进不定芽的分化，诱导丛生芽形成：添加500mg／L的酵母浸出物或20mg（此处忽略..）／L色氨酸时愈伤组织正常但不定芽诱导率显著下降；添加200mg／L脯氨酸时愈伤组织的形成被抑制，愈伤组织形成少且褐化；添加Ag~-5mg／L时部分子叶切口处褐化，形成的愈伤组织少。可见附加物有种属特异性和浓度特异性。最佳附加物为50mg／L谷氨酰胺。硕士学位论文番茄高频再生系统的建立及农杆菌介导1PT和etrl基因转化的研究5农杆菌EHA105对试材樱桃番茄转化发现:农杆菌的最佳侵染浓度为O氏川0.1一0.2;感染时间smin.为宜;最佳共培养时间为48h左右;预培养时间两天;子叶外植体在预培（此处忽略..）养和共培养时正置为佳，在脱菌培养时最好倒置培养;筛选方式以延迟筛选为佳，即脱菌培养7大后再进行筛选墙乔;筛选时，除草剂草丁一磷的筛选浓度为3:眼几。6PC尺检测结果发现，上盯和时刀基因都已整合到樱桃番茄基因组中。7尺T一pC尺检测发现，*才/一/在转录水平有一定表达。8队T酶活性检测发现转基因品种的酶活性高十术转化对照。

以上为本篇毕业论文范文番茄高频再生系统的建立及农杆菌介导IPT和etr1双基因转化研究的介绍部分。

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