高产L-精氨酸的钝齿棒杆菌在不同供氧条件的差异蛋白质组学研究

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高产L-精氨酸的钝齿棒杆菌在不同供氧条件的差异蛋白质组学研究

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毕业论文范文题目：高产L-精氨酸的钝齿棒杆菌在不同供氧条件的差异蛋白质组学研究，论文范文关键词：高产L-精氨酸的钝齿棒杆菌在不同供氧条件的差异蛋白质组学研究
高产L-精氨酸的钝齿棒杆菌在不同供氧条件的差异蛋白质组学研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：L-精氨酸(L-Arginine,L-Arg)作为一种条件性必需碱性氨基酸,是合成蛋白质、磷酸肌酸的重要原料,也是生物体内尿素循环的重要中间产物,对生物体维持正常的生理功能有重要作用。因此,L-精氨酸在食品、化妆品、临床医药等领域有广泛应用,市场需求量不断增加。本论文所用菌株钝齿棒杆菌CorynebacteriumcrenatumSYPA5-5为本实验室保藏的一株L-精氨酸高产菌株。前期研究表明C.crenatumSYPA5-5为好（文章此处忽略..）氧菌株,且供氧水平对菌体生长及L-精氨酸的合成均具有极其重要的影响,氧的供应不足不仅会抑制菌体生长,还会严重抑制L-精氨酸的合成。满足菌体高的氧需求通常有两种方法:一是提高发酵过程中发酵液的溶解氧水平,另一途径则是利用基因工程手段来提高菌体自身对氧气的利用效率。本文分别通过在摇瓶发酵中设定不同的装液量及在5L自控发酵罐分批发酵中设定不同转速的方法,建立了两类供氧差异模型,并测定了不同供氧条件下的C.crenatumSYPA（略..）5-5的发酵特性。在发酵过程中,通过双向电泳(2-DE)、质谱鉴定及数据库检索等技术,对不同供氧条件下C.crenatumSYPA5-5胞内可溶性蛋白进行差异分析。在不同时期,不同供氧条件下,共鉴定了109个差异蛋白,包括与碳源代谢、氨基酸代谢、能量代谢、翻译相关、次级代谢相关的蛋白及一些未知功能的蛋白。通过代谢途径分析发现:这些差异蛋白主要集中在HMP途径、TCA循环及尿素循环。高供氧(HOS)条件下,这些途径都有所增强,尤其是HMP途径,这（本文此处忽略..）与本实验室前期的代谢流量分析结果一致。由于HMP途径不仅调控着葡萄糖代谢的流向,还为细胞提供NADPH。因此HMP途径的增强为细胞提供了更多的NADPH,不仅为细胞提供还原力,缓解氧毒性,还作为精氨酸合成途径中N-乙酰-γ-谷氨酰磷酸还原酶的辅酶催化L-精氨酸的合成。NAD激酶可将胞内NAD(H)转变为NADP(H)。因此,本论文成功构建了携带有NAD激酶基因ppnK的表达质粒pJC1-tac-ppnK,并分别转入E.coliJM（本文此处忽略..）109和C.crenatumSYPA5-5。对重组菌株C.crenatum(pJC1-tac-ppnK)的发酵特性进行分析,结果显示,采用优化后的培养基重组菌C.c.(pJC1-tac-ppnK)L-精氨酸产量可达52.25g·L~(-1),较出发菌株(45.17g·L~(-1))提高了15.66%。重组菌株的糖酸转化率(YP/S)的由33.48%提高到了36.62%。

以上为本篇毕业论文范文高产L-精氨酸的钝齿棒杆菌在不同供氧条件的差异蛋白质组学研究的介绍部分。

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