GL-7-ACA酰化酶基因工程菌的发酵工艺优化及酶工程研究

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GL-7-ACA酰化酶基因工程菌的发酵工艺优化及酶工程研究

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毕业论文范文题目：GL-7-ACA酰化酶基因工程菌的发酵工艺优化及酶工程研究，论文范文关键词：GL-7-ACA酰化酶基因工程菌的发酵工艺优化及酶工程研究
GL-7-ACA酰化酶基因工程菌的发酵工艺优化及酶工程研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：GL-7-ACA酰化酶(EC．3．1．5．11)是两步酶法催化CPC生产7-ACA的重要工业用酶之一，它的表达量和酶活性的增加是提高7-ACA产量的前提。重组大肠杆菌E.coliBL21(DE3)pYW-GA表达GL-7-ACA酰化酶呈组成型表达，其高效表达的关键技术是补料策略。本文探索了组成型重组大肠杆菌E.coli（略..）BL21(DE3)pYW-GA高效表达的发酵工艺。在摇瓶培养获得GL-7-ACA酰化酶工程菌的最佳发酵条件的基础上，用5L自控式发酵罐进行分批补料培养。为了减少基因工程菌代谢过程中乙酸的积累，使GL-7-ACA酰化酶基因获得高效表达，发酵过程中采用不同的流加方式进行补料，同时对转速和溶氧等进行控制。考察（此处忽略..）了恒速流加、pH反馈流加和指数流加三种补料模式，比较得出菌浓最高的是pH8.0反馈流加这一模式，OD_(600)可达35，而酶活最高的模式是pH7.0反馈流加，最高酶活可达3463.8U／L。固定化金属亲和层析技术以其分离蛋白专一性强而得到广泛应用，本文以EIP-ARG-IDA-Co~(2+)为载体，从可溶性总蛋白中一步分离（此处忽略..）纯化具有His-tag标签的GL-7-ACA酰化酶。在此基础上进行了固定化方面的研究，确定固定化最适条件是150～200U／g给酶量与载体比，固定化时间16h，固定化介质pH7.0。固定化酶的最适反应温度为50℃，最适反应pH为8.0。同时还考察了固定化酶的热稳定性，重复利用性及载体的重复使用等特性。大肠杆菌E.co（此处忽略..）liBL21(DE3)pYW-GA高效表达GL-7-ACA酰化酶的发酵工艺及其固定化方法的建立为工业化生产GL-7-ACA酰化酶和两步酶法生产7-ACA奠定了基础。

以上为本篇毕业论文范文GL-7-ACA酰化酶基因工程菌的发酵工艺优化及酶工程研究的介绍部分。

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