硅基荧光纳米粒子标记食源性病原菌检测方法研究

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硅基荧光纳米粒子标记食源性病原菌检测方法研究

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毕业论文范文题目：硅基荧光纳米粒子标记食源性病原菌检测方法研究，论文范文关键词：硅基荧光纳米粒子标记食源性病原菌检测方法研究
硅基荧光纳米粒子标记食源性病原菌检测方法研究毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：食品安全是遍及全球的严重公共卫生问题,而致病性微生物引起的食源性疾病是食品安全的最大隐患之一,食源性致病菌的快速灵敏检测对于保障食品安全具有重要意义。目前,已报道的食源性致病菌检测方法多种多样,但各有其优缺点,促使研究者们积极研究灵敏度高、普遍适用性好、操作简便的新型检测方法。21世纪的两大领先技术——纳米技术和生物技术迎合了人们的需要,将纳米材料引入生物探针和传感领域,利用纳米材料构建纳米探针和传感器、可以有效提高分析测定的灵敏度、稳定性等性能,构建的新型分析方法得到了更好和更广泛的实际应用。本文将纳米探针技术与荧光分析方法结合应用于免疫分析（本文此处忽略..）及DNA杂交分析,以人免疫球蛋白G,沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、李斯特菌特定序列DNA为模式分析物,建立了新型分析方法体系,实现了对目标物的超微量检测,取得了令人满意的结果。本文首先采用反相微乳液法成功制备了分散性好、均一的Ru(bpy)3Cl2掺杂SiO2荧光纳米颗粒,采用TEM、荧光光谱等对其性能进行了表征。并以其为标记物,初步应用于人IgG的检测,建立了一种高灵敏度测定人IgG的荧光免疫新方法。研究发现,在最佳实验条件下,荧光强度和人IgG浓度在1~100ng/mL范围内成线性,检出限为0.3ng/mL,相对标准偏差为2.2%(30ng/mL,n=11)。该方法已成功应用于人（文章此处忽略..）血清中IgG含量的测定。其次,论文对Ru(bpy)3Cl2掺杂SiO2纳米粒子进行了亲和素表面修饰,进一步与生物素化的沙门氏菌序列特异寡核苷酸探针结合构建荧光纳米生物探针,以其为显示探针与沙门氏菌序列特异寡核苷酸捕获探针一起通过DNA杂交捕获沙门氏菌序列特异目标DNA,形成三明治型复合体并组装到微孔板上,通过检测显示探针荧光强度定量沙门氏菌目标DNA含量。结果表明,荧光强度和沙门氏菌的目标DNA浓度在10~1000fmol/L范围内呈良好线性关系,对目标DNA的检测限为3fmol/L(3S/N),相对标准偏差为3.3%(300fmol/L,n=11)。采用同样的原理构建了金黄色葡萄球菌目标（文章此处忽略..）DNA的新型分析方法,在实验最佳条件下,荧光强度与金黄色葡萄球菌目标DNA浓度在3~1000fmol/L范围内成线性,检出限为1fmol/L。该方法体系已成功应用于沙门氏菌、金黄色葡萄球菌菌体样品的检测当中。再次,论文基于分子信标识别和荧光纳米粒子标记技术,建立了均相体系中李斯特菌目标DNA的高灵敏检测新方法。实验以羊抗人免疫球蛋白(IgG)标记的异硫氰酸荧光素(FITC)为核材料,成功制备了FITC掺杂SiO2核壳荧光纳米颗粒,有效防止了传统方法中采用单一FITC制备纳米颗粒时泄露严重的问题。随后以FITC-IgG@SiO2荧光纳米粒子和纳米金(荧光淬灭基团)分别标记（文章此处忽略..）李斯特菌序列特异性分子信标探针5’端和3’端,成功构建了李斯特菌序列特异性分子信标荧光纳米探针,建立了均相体系中李斯特菌目标DNA的新型分析方法。在实验优化条件下,α(令α=F/F0,F代表MB和目标DNA杂交以后的荧光强度,F0代表MB完全闭合时的荧光强度)与目标DNA浓度在1~200nmol/L浓度范围内呈良好的线性关系,检出下限为0.3nmol/L,相对标准偏差为2.6%(50nmol/L,n=11)。

以上为本篇毕业论文范文硅基荧光纳米粒子标记食源性病原菌检测方法研究的介绍部分。

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