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番茄长花柱品系T431温敏相干ESTs分析及LeMBF1在花芽分化中的功能
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毕业论文范文题目:
番茄长花柱品系T431温敏相干ESTs分析及LeMBF1在花芽分化中的功能
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番茄长花柱品系T431温敏相干ESTs分析及LeMBF1在花芽分化中的功能
番茄长花柱品系T431温敏相干ESTs分析及LeMBF1在花芽分化中的功能毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】
:番茄(LycopersiconesculentumMill)属于茄科番茄属(Lycopersicon),为自花授粉作物。其养分丰富,果实中富含胡萝卜素、番茄红素、维生素C以及柠檬酸等有机酸跟无机盐等。此外,因为番茄易于转化、果实大、种子多,在动物组织培养、基因工程等研究中都是重要的模式动物。番茄在出产上重要以杂交种为主,其杂种上风明显,杂种整洁度高、抗逆性强,但目前番茄的杂交制种都以人工去雄授粉的方法进行,因此番茄雄性不育系的选育显得尤为急切跟重要。T431为经多代自交选育的番茄长花柱功能型雄性不育品系,该材料在20℃以上的田间温度下可能达到95%以上的不育率,但在低温前提下(昼/夜为18℃/10℃(略..))则花柱内缩或与花药平齐,由不育材料变为可育材料。本实验室先前已构建了T431的温敏正反向差减文库,本实验即对所得差减文库的ESTs进行了分析,并以转录辅激活因子MBF1(MultiproteinBridgingFactor1,多蛋白桥梁因子)为研究对象,克隆其全长并作了初步的表白分析,探讨它在T431花柱发育中的作用,为终极阐明T431长花柱温敏景象的调控机制提供参考。1.本实验通过菌液PCR跟反向Northern对构建的番茄T431正反向差减文库的725个克隆进行筛选,成果发明有429个克隆存在差别表白,将差别表白基因测序分析后获得了374个可利用的ESTs序列,可利用率达到87.2%。2.登陆GenBank对所得序列进行比(略..)较分析,成果显示374个可利用的ESTs序列中有324个存在蛋白编码功能,其余50个ESTs与已知蛋白质同源性较低或找不到任何同源序列。在324个存在蛋白质功能的ESTs序列中有228个序列功能己知,96个与揣测、假想或功能未知的蛋白质存在很高的同源性。3.通过BLASTx跟BLASTn对所有ESTs序列进行功能分类后,发明参加初级代谢(16%)、能量代谢(9%)、抗病与防备(12%)、信号转导(11%)等过程的基因较多,也有少数基因参加了动物体内蛋白质合成与加工、物质运输、转录调控、细胞的构造与成长发育等过程。4.选取与转录调控有关的ESTs即真核翻译起始因子(eIF-5A)、果胶酯酶(Pme)、转录辅激活因子MBF1,用半定量RT-PCR进行表白(略..)分析,发明在常温跟低温前提下eIF-5A、Pme基因在T431根、茎尖成长点、叶中的表白量基本一致,阐明这两个基因跟T431的花柱发育的低温胁迫无关。而MBF1基因在常温下于T431的根、茎尖成长点、叶中均有表白,但茎尖成长点中表白量极低;将花芽分化期的T431经低温处理3d,6d,9d后,MBF1在根中的表白量不变;在叶中表白量低温处理初期略有增加,随后降落;而在茎尖成长点低温处理3d后,其表白量明显增加,其后随低温处理时光延长,逐步降落,阐明MBF1可能参加了花器官的状况建成,克制了T431的花柱伸长。5.获得了一个编码转录辅激活因子基因MBF1的全长cDNA序列,命名为LeMBF1。该基因包含一个420bp的开放浏览(此处忽略..)框,编码140个氨基酸。经NCBI的BLASTx跟DNAMAN软件对LeMBF1的氨基酸与其余动物MBF1蛋白进行比较,发明其氨基酸序列与马铃薯的StMBF1类似性最高,达到97%。6.从T431基因组中克隆得到MBF1的全长DNA序列,将LeMBF1的DNA序列与mRNA序列进行比较发明两者完全一致,阐明该基因不含有内含子。
以上为本篇毕业论文范文
番茄长花柱品系T431温敏相干ESTs分析及LeMBF1在花芽分化中的功能
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