磺胺喹恶啉单克隆抗体的制备及酶联免疫疾速检测方法的树破

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磺胺喹恶啉单克隆抗体的制备及酶联免疫疾速检测方法的树破

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毕业论文范文题目：磺胺喹恶啉单克隆抗体的制备及酶联免疫疾速检测方法的树破，论文范文关键词：磺胺喹恶啉单克隆抗体的制备及酶联免疫疾速检测方法的树破
磺胺喹恶啉单克隆抗体的制备及酶联免疫疾速检测方法的树破毕业论文范文介绍开始：
【论文摘要】：磺胺喹恶啉(Sulfaquinoxaline,SQ)是一种高效抗球虫剂跟抗菌剂,重要用于医治家禽、反刍幼畜及小动物的球虫病。养殖场为防治跟医治动物疾病常在动物饲料或饮用水中参加磺胺喹恶啉,常导致畜禽急慢性中毒跟畜禽制品的药物残留,人常常低剂量摄入含有磺胺喹恶啉残留的动物源性食品,当它在体内富集达必定浓度时,可造成变态反应、过敏反应,甚至致畸、致癌作用。因此各国都比较器重其残留的检测问题,中国及欧盟、日本、美国等西方发达国度规定磺胺喹恶啉残留限量为100ng/g。目前,在药残检测范畴,免疫学分析方法因其操作简便、疾速、灵敏度高、特异性强、本钱低、可实现批量检测的（本文此处忽略..）上风已成为国内外研究热点。本研究旨在树破磺胺喹恶啉残留的酶联免疫检测(ELISA)方法,以便利养殖户自检,并为有效监管磺胺喹恶啉的利用及残留情况提供更好的研究根据。本研究根据磺胺喹恶啉与载体蛋白(BSA、OVA)的分子构造,采取重氮化法合成免疫原原BSA-SQ,进而制备单克隆抗体,终极成功研制出磺胺喹恶啉直接竞争ELISA疾速检测试剂盒。重要研究成果如下:1.磺胺喹恶啉完全抗原的制备及鉴定分辨用戊二醛(GA)法、碳二亚胺(EDC)法、重氮化法摸索人工抗原BSA-SQ的制备,并用紫外扫描(UV)、SDS-PAGE电泳对其进行初步鉴定。成果表明:采取GA法与EDC法制得的BS（文章此处忽略..）A-SQ偶联后果不幻想,用重氮化法制备BSA-SQ后果较好。将重氮化法制备的人工抗原BSA-SQ免疫BALB/C小鼠,获得了高价、敏感的抗磺胺喹恶啉多克隆抗体(pAb),断定重氮化法制备人工抗原BSA-SQ获得成功。2.磺胺喹恶啉单克隆抗体的制备及免疫学特点的鉴定经BSA-SQ免疫产生多抗的BABL/C小鼠,用酶联免疫吸附实验(ELISA)实验筛选出细胞融合备用小鼠1只;超免后,将其脾细胞与NS0瘤细胞用PEG4000进行细胞融合,HAT培养液筛选培养;有限稀释法进行3次克隆化,获得了3株产磺胺喹恶啉单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株1H8-B11、1H8-C6、1H8-F5;采取体内诱生腹水法大量（文章此处忽略..）出产后纯化。经鉴定,1H8-B11、1H8-C6、1H8-F5细胞培养上清间接ELISA效价分辨为1:1.92×10~2、1:1.92×10~2、1:3.84×10~2,腹水效价分辨为1:2.0×10~5、1:2.0×10~5、1:2.56×10~5,亲跟力测定表明细胞株1H8-F5亲跟常数(Ka)最高,为4.19×10~9L/moL,阻断ELISA测定其SQIC50为13.1ng/mL,与磺胺氯吡嗪钠的穿插反应率(CR)为20%,与其余同类化合物无CR。3.磺胺喹恶啉的酶联免疫疾速检测方法的树破在制得SQmAb的基本上,根据直接竞争ELISA实验原理,组装制备了SQ残留疾速检测直接竞争ELISA试剂盒(SQ-Kit)。SQ-Kit标准曲线回归方程为y=-0.262x+0.6778,相干联数R~2=0.9786,SQIC50为7.（文章此处忽略..）5ng/mL,检测下限为5.0ng/mL。线性检测范畴为5.0~128.0ng/mL,并存在良好的特异性、反复性跟牢固性。该SQ-Kit用于检测牛奶跟肉样中磺胺喹恶啉残留的工作可能在1.5~2h内实现,存在疾速、简便、敏感、特异等特点,合适于SQ残留疾速检测的大范围定性、定量鉴定。

以上为本篇毕业论文范文磺胺喹恶啉单克隆抗体的制备及酶联免疫疾速检测方法的树破的介绍部分。

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