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氯霉素的高灵敏时间分辨荧光免疫分析方法的建立

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毕业论文范文题目:氯霉素的高灵敏时间分辨荧光免疫分析方法的建立,论文范文关键词:氯霉素的高灵敏时间分辨荧光免疫分析方法的建立
氯霉素的高灵敏时间分辨荧光免疫分析方法的建立毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:氯霉素(chloramphenicol,CAP)在食品中的残留导致了许多恶性疾病,并对人体产生严重危害。美国、加拿大、欧盟和中国等许多国家规定了CAP在所有食品动物的可食用组织中不得检出,所以建立一种高灵敏的检测方法十分必要。时间分辨荧光免疫分析方法(Time-resolvedfluoroimmunoassay,TRFIA)是近十年发展起来的一种新兴的非放射性免(此处忽略..)疫标记技术,具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优点,并且非常适合大规模样品的筛选。本论文旨在建立高灵敏的、快速检测CAP时间分辨荧光免疫分析方法(CAP-TRFIA)。将CAP与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原与包被抗原,以CAP-BSA免疫新西兰大白兔制备CAP多克隆抗体,以CAP-OVA包被96孔板为固相抗原,与CAP标准品(游离抗原)竞争结合(文章此处忽略..)CAP抗体,用稀土离子Eu3+标记的羊抗兔抗体进行示踪,建立起间接竞争CAP-TRFIA检测方法。该方法的灵敏度为0.008ng/ml(8ppt),测量范围0.008ng/ml~100ng/ml,不同时间进行的CAP-TRFIA的效应点值ED20、ED50、ED80分别为(25.75±0.442ng/ml、(0.917±0.081)ng/ml、(0.033±0.0016)ng/ml。批内变异系数6.8%,批间变异系数13.5%。与琥珀酸氯霉素的交叉反应率为19.28%,与甲砜霉(此处忽略..)素的交叉反应率小于0.1%,与青霉素、诺氟沙星的交叉反应率小于0.01%。牛奶、蜂蜜、虾和鸡肉样品的平均回收率分别为79.7%、112.6%、92.1%和97.1%。考核方法的热稳定性显示有效期应在六个月以上。相比较,酶联免疫吸附检测法(Enzyme-LinkedImmunoSorbentAssay,ELISA)试剂盒的灵敏度是0.05ng/ml,TRFIA有明显提高。由于酶受温度、pH等各因素的影响,ELIS(文章此处忽略..)A试剂盒也存在稳定性差,易产生假阳性等诸多问题。研究表明,CAP-TRFIA是目前报导的CAP检测中最灵敏的方法,具有很好的应用前景。


以上为本篇毕业论文范文氯霉素的高灵敏时间分辨荧光免疫分析方法的建立的介绍部分。
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