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刺糖多孢菌amt基因的克隆与功能研究

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毕业论文范文题目:刺糖多孢菌amt基因的克隆与功能研究,论文范文关键词:刺糖多孢菌amt基因的克隆与功能研究
刺糖多孢菌amt基因的克隆与功能研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:氮素是生物体内蛋白质、核酸跟一些辅因子等含氮化合物的重要组分,它的代谢作为一种重要的生福气动,广泛存在于所有的生物体中。而氨(铵离子)是被生物体接收的最为经济有效的一种氮素情势,是生物体内氮素转运的的重要情势之一。铵离子作为氮素代谢的核心环节,是生物体内所有氮源的终极代谢产物跟生物体内所需的氨基酸、核酸跟辅因子等氮类化合物的生物合成的底物。生物体对环境中的NH4+的接收跟NH4+在组织间的转运,是由(略..)位于细胞原生质膜上的NH4+转运蛋白(铵载体)介导的需能主动运输过程。因此,咱们在跟刺糖多孢菌亲缘关联较近的天蓝色链霉菌(Streptomycescoelicolor)M145跟变铅青链霉菌(Streptomyceslividans)TK24中适量表白铵转运蛋白(ammoniumtransporter),以期改良M145跟TK24的氮源环境,并进一步探讨铵转运蛋白Amt对M145跟TK24代谢的影响。本论文以刺糖多孢菌(Saccharopo(本文此处忽略..)lysporaspinosa)基因组为模板扩增铵转运蛋白基因(ammoniumtransportergene),并对其进行测序,经过酶切、连接,并回收,将其连入pMD18-T载体中,转化大肠杆菌Top10,构建到大肠杆菌-链霉菌穿梭载体pMF上,再借助接合转移,将该基因导入天蓝色链霉菌M145跟变铅青链霉菌TK24中,在双向启动子PactⅠ/Ⅲ的作用下适量表白铵转运蛋白,比较转化子跟野生型的表型,分析该基因的适量表(略..)白对天蓝色链霉菌M145跟变铅青链霉菌TK24代谢的影响。对原始菌株跟接合子进行固体平板培养跟液体摇瓶发酵培养,并进行了次生代谢产物放线紫红素产量的测定跟菌体状况察看,成果发明:转化子M145/pMF-amt的Act摇瓶发酵产量是对比株M145的2.85倍,转化子TK24/pMF-amt的Act摇瓶发酵产量是对比株TK24的30.02倍,而对比菌株M145跟M145/pMF、TK24跟TK24/pMF之间并不很大差别。接种R4C固体培养基,察看色素跟孢子构(略..)成情况,发明转化子M145/pMF-amt跟TK24/pMF-amt的产孢量高于对比株,并且色素构成的起始时光比两株对比菌都要早。本研究首次从刺糖多孢菌中克隆了铵转运蛋白,并且在链霉菌模式菌株中进行了初步的功能研究,为后续的研究工作奠定了基本。


以上为本篇毕业论文范文刺糖多孢菌amt基因的克隆与功能研究的介绍部分。
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