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不同浓度富血小板血浆应用于骨组织工程的研究

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毕业论文范文题目:不同浓度富血小板血浆应用于骨组织工程的研究,论文范文关键词:不同浓度富血小板血浆应用于骨组织工程的研究
不同浓度富血小板血浆应用于骨组织工程的研究毕业论文范文介绍开始:
【论文摘要】:目的:体外观察不同浓度犬富血小板血浆(PRP)对自体骨髓间充质细胞(MSCs)增殖、分化和mRNA表达的影响,初步评估PRP对MSCs的骨诱导作用,并得到最佳使用浓度,探讨组织工程学方法用于骨组织再生的可行性。方法:利用二次离心法提取狗静脉血中的PRP,行血小板计数,激活制备富生长因子血清(serumrichingrowthfactors,SRGF),并与无血清D-MEM/F-12液(略..)配制得到1%、5%、10%、20%、30%共5个浓度的SRGF;利用密度梯度离心法提取培养狗MSCs并进行传代,每日观察并照相;利用四唑盐比色法(MTT法)观察不同浓度PRP(1%、5%、10%、20%、30%)于第1、3、5、7、9天共5个时间点对MSCs增殖的影响;用酶动力学法测定不同浓度PRP及rhBMP于第3、6、9、12天碱性磷酸酶(ALP)活性影响;对经PRP诱导后的MSCs用改良钙钴法行ALP染色,茜素红法行矿化结节染色,分7、14、21、28d4个时间点(略..)测量骨钙素(OCN)的含量;半定量RT-PCR法测定不同浓度PRP及rhBMP诱导后的MSCs中ALPmRNA及OCNmRNA水平。结果:原代培养的骨髓间充质细胞24-48h开始贴壁,12d后细胞融汇成单层,细胞多呈成纤维梭形细胞形态,经PRP诱导后,细胞数目明显增多,形态渐变为方形、多角形,4-5天融成单层,8-10天形成多层细胞层;血小板记数显示PRP中血小板浓度为全血的5.38倍,含量达到要求(本文此处忽略..);MTT法检测见各浓度PRP组均出现不同程度增殖,10%PRP组尤为显著;酶动力学法测定示各浓度PRP组ALP活性均较对照组增高,10%PRP组和rhBMP更为显著;MSCs经PRP诱导后,ALP染色强阳性;钙化结节增多;骨钙素表达量增高,有显著差异;经不同浓度PRP诱导后的MSCs经半定量RT-PCR分析见ALPmRNA及OCNmRNA水平均增高,其中以10%PRP组和rhBMP为显(此处忽略..)著。结论:本实验中各浓度(1%、5%、10%、20%、30%)PRP均能有效的促使MSCs向成骨细胞分化,促进骨再生。其中以10%PRP为最佳浓度,可用来修复骨缺损,是组织工程骨研究的一个突破。


以上为本篇毕业论文范文不同浓度富血小板血浆应用于骨组织工程的研究的介绍部分。
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